临床输血与检验
臨床輸血與檢驗
림상수혈여검험
JOURNAL OF CLINICAL TRANSFUSION AND LABORATORY MEDICINE
2015年
2期
111-113
,共3页
Seipin基因%质粒%真核表达%免疫荧光
Seipin基因%質粒%真覈錶達%免疫熒光
Seipin기인%질립%진핵표체%면역형광
Seipin gene%Plasmid%Eukaryotic expression%Immunofluorescence assay
目的 构建人Seipin基因的真核表达质粒并转染293T细胞后进行鉴定.方法 采用PCR法从人睾丸组织中扩增人Seipin基因,通过BamHI/XhoI限制性酶切位点克隆入真核表达载体pEGFP-C1内,构建含人Seipin基因的真核表达质粒pEGFP-Seipin.运用真核转染、Western blot和免疫荧光实验的方法,鉴定Seipin在真核细胞293T中的表达.结果 克隆的人Seipin基因,测序结果显示完全正确.瞬时转染真核细胞293T后,采用Western blot在预期的位置检测出目的条带,免疫荧光实验显示293T细胞中存在人Seipin基因的表达.结论 成功构建了含人Seipin基因的真核表达质粒.
目的 構建人Seipin基因的真覈錶達質粒併轉染293T細胞後進行鑒定.方法 採用PCR法從人睪汍組織中擴增人Seipin基因,通過BamHI/XhoI限製性酶切位點剋隆入真覈錶達載體pEGFP-C1內,構建含人Seipin基因的真覈錶達質粒pEGFP-Seipin.運用真覈轉染、Western blot和免疫熒光實驗的方法,鑒定Seipin在真覈細胞293T中的錶達.結果 剋隆的人Seipin基因,測序結果顯示完全正確.瞬時轉染真覈細胞293T後,採用Western blot在預期的位置檢測齣目的條帶,免疫熒光實驗顯示293T細胞中存在人Seipin基因的錶達.結論 成功構建瞭含人Seipin基因的真覈錶達質粒.
목적 구건인Seipin기인적진핵표체질립병전염293T세포후진행감정.방법 채용PCR법종인고환조직중확증인Seipin기인,통과BamHI/XhoI한제성매절위점극륭입진핵표체재체pEGFP-C1내,구건함인Seipin기인적진핵표체질립pEGFP-Seipin.운용진핵전염、Western blot화면역형광실험적방법,감정Seipin재진핵세포293T중적표체.결과 극륭적인Seipin기인,측서결과현시완전정학.순시전염진핵세포293T후,채용Western blot재예기적위치검측출목적조대,면역형광실험현시293T세포중존재인Seipin기인적표체.결론 성공구건료함인Seipin기인적진핵표체질립.
