中国病理生理杂志
中國病理生理雜誌
중국병리생리잡지
CHINESE JOURNAL OF PATHOPHYSIOLOGY
2015年
5期
929-933
,共5页
李强%王九江%罗水发%朱俊杰
李彊%王九江%囉水髮%硃俊傑
리강%왕구강%라수발%주준걸
膀胱癌%ABCE1基因%T24细胞%细胞增殖
膀胱癌%ABCE1基因%T24細胞%細胞增殖
방광암%ABCE1기인%T24세포%세포증식
Bladder cancer%ABCE1 gene%T24 cells%Cell proliferation
目的：本实验通过沉默ABCE1基因在人膀胱癌T24细胞中的表达，探讨ABCE1基因对细胞的生长、细胞周期及迁移等方面的作用。方法：设计及合成ABCE1的siRNA序列，LipofectamineTM 2000转染T24细胞。采用RT-PCR和Western blot法检测基因沉默后ABCE1 mRNA和蛋白的表达情况，采用流式细胞术检测T24细胞周期。并通过CCK-8增殖实验、划痕愈合实验和细胞侵袭实验评价沉默ABCE1基因对T24细胞增殖、迁移以及侵袭能力的影响。结果：沉默ABCE1基因48 h后， T24细胞ABCE1 mRNA及蛋白表达明显降低，差异有统计学意义。 T24的细胞周期被阻滞于G0／G1期，且S期的细胞数减少，差异有统计学意义。与对照组和空白组相比，CCK-8增殖实验显示，实验组T24细胞的增殖受到明显抑制。划痕愈合实验显示，实验组迁移能力显著下降，差异有统计学意义。 Transwell小室法示，实验组T24细胞的侵袭能力显著下降，差异有统计学意义。结论：特异性干扰ABCE1基因表达可抑制人膀胱癌T24细胞的迁移能力，并抑制肿瘤细胞增殖，因此，ABCE1的siRNA序列可能成为治疗膀胱癌的有效靶点。
目的：本實驗通過沉默ABCE1基因在人膀胱癌T24細胞中的錶達，探討ABCE1基因對細胞的生長、細胞週期及遷移等方麵的作用。方法：設計及閤成ABCE1的siRNA序列，LipofectamineTM 2000轉染T24細胞。採用RT-PCR和Western blot法檢測基因沉默後ABCE1 mRNA和蛋白的錶達情況，採用流式細胞術檢測T24細胞週期。併通過CCK-8增殖實驗、劃痕愈閤實驗和細胞侵襲實驗評價沉默ABCE1基因對T24細胞增殖、遷移以及侵襲能力的影響。結果：沉默ABCE1基因48 h後， T24細胞ABCE1 mRNA及蛋白錶達明顯降低，差異有統計學意義。 T24的細胞週期被阻滯于G0／G1期，且S期的細胞數減少，差異有統計學意義。與對照組和空白組相比，CCK-8增殖實驗顯示，實驗組T24細胞的增殖受到明顯抑製。劃痕愈閤實驗顯示，實驗組遷移能力顯著下降，差異有統計學意義。 Transwell小室法示，實驗組T24細胞的侵襲能力顯著下降，差異有統計學意義。結論：特異性榦擾ABCE1基因錶達可抑製人膀胱癌T24細胞的遷移能力，併抑製腫瘤細胞增殖，因此，ABCE1的siRNA序列可能成為治療膀胱癌的有效靶點。
목적：본실험통과침묵ABCE1기인재인방광암T24세포중적표체，탐토ABCE1기인대세포적생장、세포주기급천이등방면적작용。방법：설계급합성ABCE1적siRNA서렬，LipofectamineTM 2000전염T24세포。채용RT-PCR화Western blot법검측기인침묵후ABCE1 mRNA화단백적표체정황，채용류식세포술검측T24세포주기。병통과CCK-8증식실험、화흔유합실험화세포침습실험평개침묵ABCE1기인대T24세포증식、천이이급침습능력적영향。결과：침묵ABCE1기인48 h후， T24세포ABCE1 mRNA급단백표체명현강저，차이유통계학의의。 T24적세포주기피조체우G0／G1기，차S기적세포수감소，차이유통계학의의。여대조조화공백조상비，CCK-8증식실험현시，실험조T24세포적증식수도명현억제。화흔유합실험현시，실험조천이능력현저하강，차이유통계학의의。 Transwell소실법시，실험조T24세포적침습능력현저하강，차이유통계학의의。결론：특이성간우ABCE1기인표체가억제인방광암T24세포적천이능력，병억제종류세포증식，인차，ABCE1적siRNA서렬가능성위치료방광암적유효파점。
AIM:To investigate the effect of small interfering RNA ( siRNA)-mediated ABCE1 knockdown on the survival, cell cycle and invasion of human bladder cancer cell line T24.METHODS:The siRNA against ABCE1 was constructed and transfected into the T24 cells with LipofectamineTM 2000.The expression of ABCE1 was detected by RT-PCR and Western blot.Flow cytometry was used to detect the cell cycle.The effects of ABCE1 gene silencing on prolifera-tion, migration and invasion of T24 cells were evaluated by CCK-8 assay, wound-healing assay and Transwell invasion as-say, respectively.RESULTS: Compared with control group and blank group, the mRNA and protein levels of ABCE1 were significantly decreased in experimental group after transfected with ABCE1 siRNA.The cell cycle was arrested at G0/G1 phase and the cell number in S phase was decreased in the T24 cells.Compared with control group and blank group, the proliferation of T24 cells in experimental group was inhibited significantly, and the migration and invasion abilities of T24 cells in experimental group decreased significantly.CONCLUSION:Knockdown of ABCE1 gene may decrease migration, invasion and proliferation abilities in T24 cells.
