江苏农业科学
江囌農業科學
강소농업과학
JIANGSU AGRICULTURAL SCIENCES
2015年
3期
13-16
,共4页
水稻%芦苇%抑制消减杂交%cDNA文库%基因表达
水稻%蘆葦%抑製消減雜交%cDNA文庫%基因錶達
수도%호위%억제소감잡교%cDNA문고%기인표체
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通过花粉管通道转导芦苇总DNA到水稻辽星1号中,以获得的2个耐盐变异水稻品系H1、H2为材料,对6张叶的水稻幼苗进行0.3％浓度的NaCl溶液诱导处理24h.提取经NaCl溶液诱导后的叶片mRNA,经反转录成cDNA,经过酶解后加接头和2次杂交,构建差异表达的抑制消减(SSH) cDNA文库.以NaCl溶液诱导后的耐盐变异水稻H1、H2的cDNA为检测子(tester),以水稻辽星1号cDNA为驱动子(driver).所构建的文库容量分别达到了240、281个,表明所构建的文库质量良好.对文库中克隆进行测序分析,在NCBI水稻数据库中进行BLAST比对,获得了15个没有同源性的EST序列,其中9个EST序列功能与植物的抗盐性有关,通过RT-PCR技术进一步验证了芦苇总DNA转导到水稻中,使水稻获得了抗盐性.
通過花粉管通道轉導蘆葦總DNA到水稻遼星1號中,以穫得的2箇耐鹽變異水稻品繫H1、H2為材料,對6張葉的水稻幼苗進行0.3％濃度的NaCl溶液誘導處理24h.提取經NaCl溶液誘導後的葉片mRNA,經反轉錄成cDNA,經過酶解後加接頭和2次雜交,構建差異錶達的抑製消減(SSH) cDNA文庫.以NaCl溶液誘導後的耐鹽變異水稻H1、H2的cDNA為檢測子(tester),以水稻遼星1號cDNA為驅動子(driver).所構建的文庫容量分彆達到瞭240、281箇,錶明所構建的文庫質量良好.對文庫中剋隆進行測序分析,在NCBI水稻數據庫中進行BLAST比對,穫得瞭15箇沒有同源性的EST序列,其中9箇EST序列功能與植物的抗鹽性有關,通過RT-PCR技術進一步驗證瞭蘆葦總DNA轉導到水稻中,使水稻穫得瞭抗鹽性.
통과화분관통도전도호위총DNA도수도료성1호중,이획득적2개내염변이수도품계H1、H2위재료,대6장협적수도유묘진행0.3％농도적NaCl용액유도처리24h.제취경NaCl용액유도후적협편mRNA,경반전록성cDNA,경과매해후가접두화2차잡교,구건차이표체적억제소감(SSH) cDNA문고.이NaCl용액유도후적내염변이수도H1、H2적cDNA위검측자(tester),이수도료성1호cDNA위구동자(driver).소구건적문고용량분별체도료240、281개,표명소구건적문고질량량호.대문고중극륭진행측서분석,재NCBI수도수거고중진행BLAST비대,획득료15개몰유동원성적EST서렬,기중9개EST서렬공능여식물적항염성유관,통과RT-PCR기술진일보험증료호위총DNA전도도수도중,사수도획득료항염성.
