实验动物与比较医学
實驗動物與比較醫學
실험동물여비교의학
LABORATORY ANIMAL AND COMPARATIVE MEDICINE
2015年
2期
155-160
,共6页
强苏静%陶凌云%刘丽均%徐平%高诚
彊囌靜%陶凌雲%劉麗均%徐平%高誠
강소정%도릉운%류려균%서평%고성
链脲佐菌素(STZ)%体外受精%基因芯片%差异表达
鏈脲佐菌素(STZ)%體外受精%基因芯片%差異錶達
련뇨좌균소(STZ)%체외수정%기인심편%차이표체
Streptozotocin(STZ)%In vitro fertilization%Microarray%Differentially expression
目的 通过腹腔注射链脲佐菌素(streptozotocin,STZ)构建小鼠糖尿病(diabetes mellitus,DM) 模型后,运用体外受精技术研究母体高血糖环境对早期胚胎发育的影响.方法 选取6~8周龄ICR雌鼠经2次腹腔注射小剂量STZ构建小鼠糖尿病模型,并设实验对照组.实验母鼠体外受精得到2-细胞胚胎,统计受精率等,并将2-细胞胚胎移植至代孕母鼠体内.取14 d胎龄的胚胎提取总RNA,用Agilent 2100 Bioanalyzer系统对总RNA进行质检合格后,经过逆转录、标记、杂交、洗脱,芯片结果用Affymetrix Scanner 3000进行扫描,用Command Console Software 3.1读取原始数据,实验重复3次,比较实验组与对照组的基因表达的差异情况.结果 较高血糖组(血糖为9.5 ~ 15.5 mmol/L)母鼠卵子体外受精后发育到2-细胞胚胎的比例为52.3%与对照组的72.1%存在显著统计学差异(P<0.01),高血糖组(血糖值>15.5 mmol/L)胚胎发育到2-细胞的比例为44.2%与对照组相比也存在显著统计学差异(P<0.01).芯片筛选出差异表达基因121个(P<0.05),其中有119个基因实验组的表达量是对照组的0.5倍以下,2个基因实验组的表达量是对照组的2倍以上.结论 糖尿病小鼠的卵子与正常精子体外受精后发育到2-细胞的比例较对照组小鼠低,并且血糖值越高比例越低.由此说明母体糖尿病环境能影响其卵子的生长发育,并且这些影响可能是通过上调代谢相关基因和下调发育相关基因产生的.
目的 通過腹腔註射鏈脲佐菌素(streptozotocin,STZ)構建小鼠糖尿病(diabetes mellitus,DM) 模型後,運用體外受精技術研究母體高血糖環境對早期胚胎髮育的影響.方法 選取6~8週齡ICR雌鼠經2次腹腔註射小劑量STZ構建小鼠糖尿病模型,併設實驗對照組.實驗母鼠體外受精得到2-細胞胚胎,統計受精率等,併將2-細胞胚胎移植至代孕母鼠體內.取14 d胎齡的胚胎提取總RNA,用Agilent 2100 Bioanalyzer繫統對總RNA進行質檢閤格後,經過逆轉錄、標記、雜交、洗脫,芯片結果用Affymetrix Scanner 3000進行掃描,用Command Console Software 3.1讀取原始數據,實驗重複3次,比較實驗組與對照組的基因錶達的差異情況.結果 較高血糖組(血糖為9.5 ~ 15.5 mmol/L)母鼠卵子體外受精後髮育到2-細胞胚胎的比例為52.3%與對照組的72.1%存在顯著統計學差異(P<0.01),高血糖組(血糖值>15.5 mmol/L)胚胎髮育到2-細胞的比例為44.2%與對照組相比也存在顯著統計學差異(P<0.01).芯片篩選齣差異錶達基因121箇(P<0.05),其中有119箇基因實驗組的錶達量是對照組的0.5倍以下,2箇基因實驗組的錶達量是對照組的2倍以上.結論 糖尿病小鼠的卵子與正常精子體外受精後髮育到2-細胞的比例較對照組小鼠低,併且血糖值越高比例越低.由此說明母體糖尿病環境能影響其卵子的生長髮育,併且這些影響可能是通過上調代謝相關基因和下調髮育相關基因產生的.
목적 통과복강주사련뇨좌균소(streptozotocin,STZ)구건소서당뇨병(diabetes mellitus,DM) 모형후,운용체외수정기술연구모체고혈당배경대조기배태발육적영향.방법 선취6~8주령ICR자서경2차복강주사소제량STZ구건소서당뇨병모형,병설실험대조조.실험모서체외수정득도2-세포배태,통계수정솔등,병장2-세포배태이식지대잉모서체내.취14 d태령적배태제취총RNA,용Agilent 2100 Bioanalyzer계통대총RNA진행질검합격후,경과역전록、표기、잡교、세탈,심편결과용Affymetrix Scanner 3000진행소묘,용Command Console Software 3.1독취원시수거,실험중복3차,비교실험조여대조조적기인표체적차이정황.결과 교고혈당조(혈당위9.5 ~ 15.5 mmol/L)모서란자체외수정후발육도2-세포배태적비례위52.3%여대조조적72.1%존재현저통계학차이(P<0.01),고혈당조(혈당치>15.5 mmol/L)배태발육도2-세포적비례위44.2%여대조조상비야존재현저통계학차이(P<0.01).심편사선출차이표체기인121개(P<0.05),기중유119개기인실험조적표체량시대조조적0.5배이하,2개기인실험조적표체량시대조조적2배이상.결론 당뇨병소서적란자여정상정자체외수정후발육도2-세포적비례교대조조소서저,병차혈당치월고비례월저.유차설명모체당뇨병배경능영향기란자적생장발육,병차저사영향가능시통과상조대사상관기인화하조발육상관기인산생적.