内科急危重症杂志
內科急危重癥雜誌
내과급위중증잡지
JOURNAL OF INTERNAL INTENSIVE MEDICINE
2015年
2期
138-140
,共3页
徐华%徐昕%杨进国%杨剑%曾文强%刘少帮%刘少华%陈武
徐華%徐昕%楊進國%楊劍%曾文彊%劉少幫%劉少華%陳武
서화%서흔%양진국%양검%증문강%류소방%류소화%진무
抗凝%溶栓%重组葡激酶-水蛭素融合蛋白%酵母表达体系
抗凝%溶栓%重組葡激酶-水蛭素融閤蛋白%酵母錶達體繫
항응%용전%중조포격매-수질소융합단백%효모표체체계
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目的:探讨抗凝溶栓重组葡激酶-水蛭素融合蛋白的构建效果与抗凝溶栓活性表达情况.方法:在间接实验中,选择pBV-重组葡激酶-水蛭素融合蛋白质质粒进行酵母大量表达,再进行两级纯化分析;去纯化的单位进行抗凝溶栓的检测.结果:工程菌酵母发酵培养诱导1h后就可以检测到重组葡激酶-水蛭素融合蛋白表达,表达量随发酵时间的增加而递增.两级纯化的重复性非常好,纯度经RP-HPLC测定在98％以上.重组葡激酶-水蛭素融合蛋白的溶栓活性明显高于水蛭素与葡激酶的单纯溶栓活性(P＜0.05).重组葡激酶-水蛭素融合蛋白具有更强的纤溶酶原激活活性,明显高于水蛭素与葡激酶的单纯纤溶酶原激活活性(P＜0.05).结论:重组葡激酶-水蛭素融合蛋白生产工艺具有很好的诱导与纯化效果,重组葡激酶-水蛭素融合蛋白能发挥较好的抗凝与溶栓作用.
目的:探討抗凝溶栓重組葡激酶-水蛭素融閤蛋白的構建效果與抗凝溶栓活性錶達情況.方法:在間接實驗中,選擇pBV-重組葡激酶-水蛭素融閤蛋白質質粒進行酵母大量錶達,再進行兩級純化分析;去純化的單位進行抗凝溶栓的檢測.結果:工程菌酵母髮酵培養誘導1h後就可以檢測到重組葡激酶-水蛭素融閤蛋白錶達,錶達量隨髮酵時間的增加而遞增.兩級純化的重複性非常好,純度經RP-HPLC測定在98％以上.重組葡激酶-水蛭素融閤蛋白的溶栓活性明顯高于水蛭素與葡激酶的單純溶栓活性(P＜0.05).重組葡激酶-水蛭素融閤蛋白具有更彊的纖溶酶原激活活性,明顯高于水蛭素與葡激酶的單純纖溶酶原激活活性(P＜0.05).結論:重組葡激酶-水蛭素融閤蛋白生產工藝具有很好的誘導與純化效果,重組葡激酶-水蛭素融閤蛋白能髮揮較好的抗凝與溶栓作用.
목적:탐토항응용전중조포격매-수질소융합단백적구건효과여항응용전활성표체정황.방법:재간접실험중,선택pBV-중조포격매-수질소융합단백질질립진행효모대량표체,재진행량급순화분석;거순화적단위진행항응용전적검측.결과:공정균효모발효배양유도1h후취가이검측도중조포격매-수질소융합단백표체,표체량수발효시간적증가이체증.량급순화적중복성비상호,순도경RP-HPLC측정재98％이상.중조포격매-수질소융합단백적용전활성명현고우수질소여포격매적단순용전활성(P＜0.05).중조포격매-수질소융합단백구유경강적섬용매원격활활성,명현고우수질소여포격매적단순섬용매원격활활성(P＜0.05).결론:중조포격매-수질소융합단백생산공예구유흔호적유도여순화효과,중조포격매-수질소융합단백능발휘교호적항응여용전작용.
