棉花学报
棉花學報
면화학보
COTTON SCIENCE
2015年
2期
111-117
,共7页
刘凯%张华崇%齐放军%张文蔚%简桂良
劉凱%張華崇%齊放軍%張文蔚%簡桂良
류개%장화숭%제방군%장문위%간계량
棉花%大丽轮枝菌%SKIP35%qRT-PCR%VIGS
棉花%大麗輪枝菌%SKIP35%qRT-PCR%VIGS
면화%대려륜지균%SKIP35%qRT-PCR%VIGS
cotton%Verticillium dahliae%SKIP35%real-time quantitative reverse-transcription polymerase chain reaction%virus induced gene silencing
以中植棉KV1 SSH文库为基础,从陆地棉中植棉KV1中克隆出来泛素途径SKIP35基因,命名为Gh-SKIP35.该基因的开放阅读框全长为1863个核苷酸,编码620个氨基酸,含有1个ANK保守结构域.进化分析表明,GhSKIP35蛋白与甜橙(Citrus sinensis)的SKIP35蛋白相似性最高.qRT-PCR分析显示:在接种大丽轮枝菌V991菌系后初期GhSKIP35基因表达量激增,12h便可达到顶峰,24～ 48 h逐渐下降,推测它在陆地棉抗黄萎病早期防卫反应中起重要作用.利用VIGS(Virus induced gene silencing)技术,在中植棉KV1中成功地沉默GhSKIP35基因;对沉默棉株接种大丽轮枝菌V991鉴定显示,其病情指数为50.75,而野生型的中植棉KV1和转化空载体棉株的病情指数分别为9.38和11.54.GhSKIP35基因沉默后,中植棉KV1对黄萎病的抗性丧失,表明GhSKIP35基因在陆地棉抗黄萎病的过程中起重要作用.
以中植棉KV1 SSH文庫為基礎,從陸地棉中植棉KV1中剋隆齣來汎素途徑SKIP35基因,命名為Gh-SKIP35.該基因的開放閱讀框全長為1863箇覈苷痠,編碼620箇氨基痠,含有1箇ANK保守結構域.進化分析錶明,GhSKIP35蛋白與甜橙(Citrus sinensis)的SKIP35蛋白相似性最高.qRT-PCR分析顯示:在接種大麗輪枝菌V991菌繫後初期GhSKIP35基因錶達量激增,12h便可達到頂峰,24～ 48 h逐漸下降,推測它在陸地棉抗黃萎病早期防衛反應中起重要作用.利用VIGS(Virus induced gene silencing)技術,在中植棉KV1中成功地沉默GhSKIP35基因;對沉默棉株接種大麗輪枝菌V991鑒定顯示,其病情指數為50.75,而野生型的中植棉KV1和轉化空載體棉株的病情指數分彆為9.38和11.54.GhSKIP35基因沉默後,中植棉KV1對黃萎病的抗性喪失,錶明GhSKIP35基因在陸地棉抗黃萎病的過程中起重要作用.
이중식면KV1 SSH문고위기출,종륙지면중식면KV1중극륭출래범소도경SKIP35기인,명명위Gh-SKIP35.해기인적개방열독광전장위1863개핵감산,편마620개안기산,함유1개ANK보수결구역.진화분석표명,GhSKIP35단백여첨등(Citrus sinensis)적SKIP35단백상사성최고.qRT-PCR분석현시:재접충대려륜지균V991균계후초기GhSKIP35기인표체량격증,12h편가체도정봉,24～ 48 h축점하강,추측타재륙지면항황위병조기방위반응중기중요작용.이용VIGS(Virus induced gene silencing)기술,재중식면KV1중성공지침묵GhSKIP35기인;대침묵면주접충대려륜지균V991감정현시,기병정지수위50.75,이야생형적중식면KV1화전화공재체면주적병정지수분별위9.38화11.54.GhSKIP35기인침묵후,중식면KV1대황위병적항성상실,표명GhSKIP35기인재륙지면항황위병적과정중기중요작용.
