中国动物传染病学报
中國動物傳染病學報
중국동물전염병학보
CHINESE JOURNAL OF VETERINARY PARASITOLOGY
2015年
2期
15-20
,共6页
陆莹梅%魏建超%夏鹏%吴亚玲%黎倩倩%武专昌%齐鹏飞%石坤%李玉明
陸瑩梅%魏建超%夏鵬%吳亞玲%黎倩倩%武專昌%齊鵬飛%石坤%李玉明
륙형매%위건초%하붕%오아령%려천천%무전창%제붕비%석곤%리옥명
盖他病毒%原核表达%E2基因
蓋他病毒%原覈錶達%E2基因
개타병독%원핵표체%E2기인
Getah virus%prokaryotic expression%E2 gene
参考GenBank(EU015066)盖他病毒(Getah virus,GETV) SH05-6中结构蛋白E2的全基因序列并对其进行密码子优化.将优化后的基因片段克隆至原核表达载体pCold Ⅰ中,构建重组表达载体pCold-E2.重组质粒转化E.coli BL21(DE3)感受态细胞,经IPTG低温诱导后,SDS-PAGE和Western blot进行分析.结果显示,在相对分子质量46 kDa处出现目的条带,与预期相符,且占大肠杆菌表达蛋白总量的80％.结果证明E2基因在大肠杆菌中获得了高效表达,并且能与抗血清发生特异性反应.本研究为GETV快速检测方法的建立和GETV流行病学调查奠定了基础.
參攷GenBank(EU015066)蓋他病毒(Getah virus,GETV) SH05-6中結構蛋白E2的全基因序列併對其進行密碼子優化.將優化後的基因片段剋隆至原覈錶達載體pCold Ⅰ中,構建重組錶達載體pCold-E2.重組質粒轉化E.coli BL21(DE3)感受態細胞,經IPTG低溫誘導後,SDS-PAGE和Western blot進行分析.結果顯示,在相對分子質量46 kDa處齣現目的條帶,與預期相符,且佔大腸桿菌錶達蛋白總量的80％.結果證明E2基因在大腸桿菌中穫得瞭高效錶達,併且能與抗血清髮生特異性反應.本研究為GETV快速檢測方法的建立和GETV流行病學調查奠定瞭基礎.
삼고GenBank(EU015066)개타병독(Getah virus,GETV) SH05-6중결구단백E2적전기인서렬병대기진행밀마자우화.장우화후적기인편단극륭지원핵표체재체pCold Ⅰ중,구건중조표체재체pCold-E2.중조질립전화E.coli BL21(DE3)감수태세포,경IPTG저온유도후,SDS-PAGE화Western blot진행분석.결과현시,재상대분자질량46 kDa처출현목적조대,여예기상부,차점대장간균표체단백총량적80％.결과증명E2기인재대장간균중획득료고효표체,병차능여항혈청발생특이성반응.본연구위GETV쾌속검측방법적건립화GETV류행병학조사전정료기출.
