成都医学院学报
成都醫學院學報
성도의학원학보
JOURNAL OF CHENGDU MEDICAL COLLEGE
2015年
2期
142-146,151
,共6页
刘桦%杨晓龙%唐丽%胡开锋%刘明佳%刘戟
劉樺%楊曉龍%唐麗%鬍開鋒%劉明佳%劉戟
류화%양효룡%당려%호개봉%류명가%류극
NGAL重组蛋白%结肠癌细胞%肿瘤转移
NGAL重組蛋白%結腸癌細胞%腫瘤轉移
NGAL중조단백%결장암세포%종류전이
Recombinant protein NGAL%Colon cancer cell%Tumor metastasis
目的 研究NGAL重组蛋白促进人结肠癌细胞SW480转移的作用机制.方法 通过基因工程方法构建重组表达载体pet32a-tev-NGAL,转化大肠杆菌(BL21-DE3)进行表达;采用亲和层析纯化,并用tev酶进行酶切获得NGAL重组蛋白;Transwell与基质胶实验检测NGAL对细胞迁移、侵袭能力的影响;Western blot检测NGAL对肿瘤转移相关蛋白表达的影响;ELISA检测不同肿瘤分期结肠癌患者血液中NGAL表达情况.结果 成功构建pet32a-tev-NGAL原核表达载体,并通过体外表达与纯化获得NGAL重组蛋白;该蛋白促进SW480的迁移和侵袭;Western blot检测结果表明,NGAL激活EMT信号通路;ELISA结果表明,NGAL表达量与肿瘤恶化程度成正相关.结论 NGAL通过激活EMT信号通路促进结肠癌细胞SW480转移.
目的 研究NGAL重組蛋白促進人結腸癌細胞SW480轉移的作用機製.方法 通過基因工程方法構建重組錶達載體pet32a-tev-NGAL,轉化大腸桿菌(BL21-DE3)進行錶達;採用親和層析純化,併用tev酶進行酶切穫得NGAL重組蛋白;Transwell與基質膠實驗檢測NGAL對細胞遷移、侵襲能力的影響;Western blot檢測NGAL對腫瘤轉移相關蛋白錶達的影響;ELISA檢測不同腫瘤分期結腸癌患者血液中NGAL錶達情況.結果 成功構建pet32a-tev-NGAL原覈錶達載體,併通過體外錶達與純化穫得NGAL重組蛋白;該蛋白促進SW480的遷移和侵襲;Western blot檢測結果錶明,NGAL激活EMT信號通路;ELISA結果錶明,NGAL錶達量與腫瘤噁化程度成正相關.結論 NGAL通過激活EMT信號通路促進結腸癌細胞SW480轉移.
목적 연구NGAL중조단백촉진인결장암세포SW480전이적작용궤제.방법 통과기인공정방법구건중조표체재체pet32a-tev-NGAL,전화대장간균(BL21-DE3)진행표체;채용친화층석순화,병용tev매진행매절획득NGAL중조단백;Transwell여기질효실험검측NGAL대세포천이、침습능력적영향;Western blot검측NGAL대종류전이상관단백표체적영향;ELISA검측불동종류분기결장암환자혈액중NGAL표체정황.결과 성공구건pet32a-tev-NGAL원핵표체재체,병통과체외표체여순화획득NGAL중조단백;해단백촉진SW480적천이화침습;Western blot검측결과표명,NGAL격활EMT신호통로;ELISA결과표명,NGAL표체량여종류악화정도성정상관.결론 NGAL통과격활EMT신호통로촉진결장암세포SW480전이.
