中国实验方剂学杂志
中國實驗方劑學雜誌
중국실험방제학잡지
CHINESE JOURNAL OF EXPERIMENTAL TRADITIONAL MEDICAL FORMULAE
2015年
10期
153-157
,共5页
补肾疏肝方%A549p%PTEN-PI3K-AKT信号通路
補腎疏肝方%A549p%PTEN-PI3K-AKT信號通路
보신소간방%A549p%PTEN-PI3K-AKT신호통로
Bushen Shugan formula%A549%PTEN-PI3K-AKT signaling pathway
目的:通过研究补肾疏肝方含药血清对PTEN-PI3 K-AKT信号通路的影响,探讨补肾疏肝方抑制肺腺癌细胞增殖和转移作用机制.方法:大鼠60只,随机分为6组,每组10只,分别为生理盐水组(NS为2 mL),顺铂组(8 mg·kg-1),补肾疏肝方低剂量组(15 g·kg-1),补肾疏肝方高剂量组(30 g·kg-1),联合顺铂低剂量组(15 g·kg-1+8 mg·kg-1),联合顺铂高剂量组(30 g·kg-1+8 mg·kg-1),每只大鼠ig,2 mL,每天2次,共5d.制备药物血清:经药物作用后的大鼠,经腹主动取血,分离血清,灭活,过滤,冻存.MTT法检测补肾疏肝方含药血清对A549细胞增殖的影响.三维细胞培养观察并计数各组细胞形成管状结构数量.RT-PCR检测含药血清对A549肺腺癌细胞AKT-1,CyclinD1,NF-κB mRNA水平的表达,Western blot检测含药血清对PTEN,p-PI3K,p-AKT蛋白水平的表达.结果:低剂量补肾疏肝方含药血清对A549细胞有抑制作用,低剂量中药与顺铂联用有协同作用且以时间依赖方式,即补肾疏肝方低剂量组与联合顺铂低剂量组在48,72,96 h的抑制率均高于其他组(P ＜0.05,P＜0.01);补肾疏肝方低剂量组与联合顺铂低剂量组拟态血管数目均低于其他组(P＜0.05,P＜0.01);补肾疏肝方低剂量组与联合顺铂低剂量组PTEN蛋白表达均高于其他组(P ＜0.05,P＜0.01),补肾疏肝方低剂量组与联合顺铂低剂量组p-PI3K,p-AKT蛋白,Akt1,CyclinD1,NF-κB的mRNA表达均低于其他组(P＜0.05,P＜0.01).结论:补肾疏肝方含药血清可通过PTEN-PI3 K-AKT信号通路抑制人肺腺癌A549细胞增殖和转移.
目的:通過研究補腎疏肝方含藥血清對PTEN-PI3 K-AKT信號通路的影響,探討補腎疏肝方抑製肺腺癌細胞增殖和轉移作用機製.方法:大鼠60隻,隨機分為6組,每組10隻,分彆為生理鹽水組(NS為2 mL),順鉑組(8 mg·kg-1),補腎疏肝方低劑量組(15 g·kg-1),補腎疏肝方高劑量組(30 g·kg-1),聯閤順鉑低劑量組(15 g·kg-1+8 mg·kg-1),聯閤順鉑高劑量組(30 g·kg-1+8 mg·kg-1),每隻大鼠ig,2 mL,每天2次,共5d.製備藥物血清:經藥物作用後的大鼠,經腹主動取血,分離血清,滅活,過濾,凍存.MTT法檢測補腎疏肝方含藥血清對A549細胞增殖的影響.三維細胞培養觀察併計數各組細胞形成管狀結構數量.RT-PCR檢測含藥血清對A549肺腺癌細胞AKT-1,CyclinD1,NF-κB mRNA水平的錶達,Western blot檢測含藥血清對PTEN,p-PI3K,p-AKT蛋白水平的錶達.結果:低劑量補腎疏肝方含藥血清對A549細胞有抑製作用,低劑量中藥與順鉑聯用有協同作用且以時間依賴方式,即補腎疏肝方低劑量組與聯閤順鉑低劑量組在48,72,96 h的抑製率均高于其他組(P ＜0.05,P＜0.01);補腎疏肝方低劑量組與聯閤順鉑低劑量組擬態血管數目均低于其他組(P＜0.05,P＜0.01);補腎疏肝方低劑量組與聯閤順鉑低劑量組PTEN蛋白錶達均高于其他組(P ＜0.05,P＜0.01),補腎疏肝方低劑量組與聯閤順鉑低劑量組p-PI3K,p-AKT蛋白,Akt1,CyclinD1,NF-κB的mRNA錶達均低于其他組(P＜0.05,P＜0.01).結論:補腎疏肝方含藥血清可通過PTEN-PI3 K-AKT信號通路抑製人肺腺癌A549細胞增殖和轉移.
목적:통과연구보신소간방함약혈청대PTEN-PI3 K-AKT신호통로적영향,탐토보신소간방억제폐선암세포증식화전이작용궤제.방법:대서60지,수궤분위6조,매조10지,분별위생리염수조(NS위2 mL),순박조(8 mg·kg-1),보신소간방저제량조(15 g·kg-1),보신소간방고제량조(30 g·kg-1),연합순박저제량조(15 g·kg-1+8 mg·kg-1),연합순박고제량조(30 g·kg-1+8 mg·kg-1),매지대서ig,2 mL,매천2차,공5d.제비약물혈청:경약물작용후적대서,경복주동취혈,분리혈청,멸활,과려,동존.MTT법검측보신소간방함약혈청대A549세포증식적영향.삼유세포배양관찰병계수각조세포형성관상결구수량.RT-PCR검측함약혈청대A549폐선암세포AKT-1,CyclinD1,NF-κB mRNA수평적표체,Western blot검측함약혈청대PTEN,p-PI3K,p-AKT단백수평적표체.결과:저제량보신소간방함약혈청대A549세포유억제작용,저제량중약여순박련용유협동작용차이시간의뢰방식,즉보신소간방저제량조여연합순박저제량조재48,72,96 h적억제솔균고우기타조(P ＜0.05,P＜0.01);보신소간방저제량조여연합순박저제량조의태혈관수목균저우기타조(P＜0.05,P＜0.01);보신소간방저제량조여연합순박저제량조PTEN단백표체균고우기타조(P ＜0.05,P＜0.01),보신소간방저제량조여연합순박저제량조p-PI3K,p-AKT단백,Akt1,CyclinD1,NF-κB적mRNA표체균저우기타조(P＜0.05,P＜0.01).결론:보신소간방함약혈청가통과PTEN-PI3 K-AKT신호통로억제인폐선암A549세포증식화전이.
