中国医药工业杂志
中國醫藥工業雜誌
중국의약공업잡지
CHINESE JOURNAL OF PHARMACEUTICALS
2015年
5期
459-461
,共3页
秦李娜%刘英%胡海峰%施云松
秦李娜%劉英%鬍海峰%施雲鬆
진리나%류영%호해봉%시운송
重组精氨酸脱亚胺酶%工程菌%遗传稳定性
重組精氨痠脫亞胺酶%工程菌%遺傳穩定性
중조정안산탈아알매%공정균%유전은정성
recombinant arginine deiminase%engineered strain%genetic stability
考察重组精氨酸脱亚胺酶工程菌E.coli BL21/pET27b-rADI的遗传稳定性.在有抗生素(卡那霉素)选择压力的条件下,采用SB平板划线连续传代50代,每10代取样保藏菌种,并进行菌落形态、质粒稳定性、限制性内切酶酶切图谱、测序、蛋白表达量及重组蛋白活性检测.结果表明,10、20、30、40和50代工程菌的菌落形态及抗生素抗性与原始工程菌无显著差异,质粒的酶切图谱一致,各代质粒稳定,DNA测序未见基因突变或丢失;经异丙基-β-D-硫代半乳糖苷诱导后,原始及传50代工程菌的重组精氨酸脱亚胺酶表达水平和蛋白质活性无显著差异.
攷察重組精氨痠脫亞胺酶工程菌E.coli BL21/pET27b-rADI的遺傳穩定性.在有抗生素(卡那黴素)選擇壓力的條件下,採用SB平闆劃線連續傳代50代,每10代取樣保藏菌種,併進行菌落形態、質粒穩定性、限製性內切酶酶切圖譜、測序、蛋白錶達量及重組蛋白活性檢測.結果錶明,10、20、30、40和50代工程菌的菌落形態及抗生素抗性與原始工程菌無顯著差異,質粒的酶切圖譜一緻,各代質粒穩定,DNA測序未見基因突變或丟失;經異丙基-β-D-硫代半乳糖苷誘導後,原始及傳50代工程菌的重組精氨痠脫亞胺酶錶達水平和蛋白質活性無顯著差異.
고찰중조정안산탈아알매공정균E.coli BL21/pET27b-rADI적유전은정성.재유항생소(잡나매소)선택압력적조건하,채용SB평판화선련속전대50대,매10대취양보장균충,병진행균락형태、질립은정성、한제성내절매매절도보、측서、단백표체량급중조단백활성검측.결과표명,10、20、30、40화50대공정균적균락형태급항생소항성여원시공정균무현저차이,질립적매절도보일치,각대질립은정,DNA측서미견기인돌변혹주실;경이병기-β-D-류대반유당감유도후,원시급전50대공정균적중조정안산탈아알매표체수평화단백질활성무현저차이.
