昆明医科大学学报
昆明醫科大學學報
곤명의과대학학보
Journal of Kunming Medical University
2015年
4期
10-14
,共5页
邵文萍%罗劭蕾%郝萍%马丽菊%唐睿株%闫凤彩
邵文萍%囉劭蕾%郝萍%馬麗菊%唐睿株%閆鳳綵
소문평%라소뢰%학평%마려국%당예주%염봉채
HLA-A*0201%基因转染%肿瘤细胞%LAK细胞
HLA-A*0201%基因轉染%腫瘤細胞%LAK細胞
HLA-A*0201%기인전염%종류세포%LAK세포
HLA-A*0201%Gene transfection%Tumor cells%LAK cells
目的 在云南宣威肺腺癌细胞XWLC-05中转染并表达外源性云南肺癌患者白细胞抗原(human leukocyte antigen,HLA)等位基因高频位点HLA-A*0201基因,以诱导肿瘤抗原特异性的细胞毒作用.方法 采用序列特异性引物扩增(PCR-SSP)法对XWLC-05细胞行HLA-DNA分型,脂质体转染法将真核质粒pcDNA3.1-HLA-A*0201导入XWLC-05细胞并用G418筛选阳性克隆,淋巴细胞分离液提取健康人外周血单个核细胞(PBMNCs)诱导培养为LAK细胞,免疫磁珠分选法提取出CD8+T淋巴细胞(CTLs),MTT法测试肿瘤特异性的细胞毒效应.结果 筛选出稳定表达HLA-A*0201基因的阳性克隆,免疫激活并分选出HLA-A*0201阳性的CTLs,该细胞对转染了HLA-A*0201基因的肿瘤细胞有更强的杀伤活性.结论 HLA-A*0201基因低表达或缺失,在导致肿瘤细胞免疫逃逸方面起重要作用,HLA-A*0201基因可诱导出HLA-A*0201限制的肿瘤特异性T淋巴细胞杀伤效应.
目的 在雲南宣威肺腺癌細胞XWLC-05中轉染併錶達外源性雲南肺癌患者白細胞抗原(human leukocyte antigen,HLA)等位基因高頻位點HLA-A*0201基因,以誘導腫瘤抗原特異性的細胞毒作用.方法 採用序列特異性引物擴增(PCR-SSP)法對XWLC-05細胞行HLA-DNA分型,脂質體轉染法將真覈質粒pcDNA3.1-HLA-A*0201導入XWLC-05細胞併用G418篩選暘性剋隆,淋巴細胞分離液提取健康人外週血單箇覈細胞(PBMNCs)誘導培養為LAK細胞,免疫磁珠分選法提取齣CD8+T淋巴細胞(CTLs),MTT法測試腫瘤特異性的細胞毒效應.結果 篩選齣穩定錶達HLA-A*0201基因的暘性剋隆,免疫激活併分選齣HLA-A*0201暘性的CTLs,該細胞對轉染瞭HLA-A*0201基因的腫瘤細胞有更彊的殺傷活性.結論 HLA-A*0201基因低錶達或缺失,在導緻腫瘤細胞免疫逃逸方麵起重要作用,HLA-A*0201基因可誘導齣HLA-A*0201限製的腫瘤特異性T淋巴細胞殺傷效應.
목적 재운남선위폐선암세포XWLC-05중전염병표체외원성운남폐암환자백세포항원(human leukocyte antigen,HLA)등위기인고빈위점HLA-A*0201기인,이유도종류항원특이성적세포독작용.방법 채용서렬특이성인물확증(PCR-SSP)법대XWLC-05세포행HLA-DNA분형,지질체전염법장진핵질립pcDNA3.1-HLA-A*0201도입XWLC-05세포병용G418사선양성극륭,림파세포분리액제취건강인외주혈단개핵세포(PBMNCs)유도배양위LAK세포,면역자주분선법제취출CD8+T림파세포(CTLs),MTT법측시종류특이성적세포독효응.결과 사선출은정표체HLA-A*0201기인적양성극륭,면역격활병분선출HLA-A*0201양성적CTLs,해세포대전염료HLA-A*0201기인적종류세포유경강적살상활성.결론 HLA-A*0201기인저표체혹결실,재도치종류세포면역도일방면기중요작용,HLA-A*0201기인가유도출HLA-A*0201한제적종류특이성T림파세포살상효응.
