昆明医科大学学报
昆明醫科大學學報
곤명의과대학학보
Journal of Kunming Medical University
2015年
4期
6-9,18
,共5页
蒙俊%杨堃%黄洁%叶联华%陈华梅%汪珺%方育
矇俊%楊堃%黃潔%葉聯華%陳華梅%汪珺%方育
몽준%양곤%황길%협련화%진화매%왕군%방육
大肠杆菌%qseC基因%Red同源重组%运动能力
大腸桿菌%qseC基因%Red同源重組%運動能力
대장간균%qseC기인%Red동원중조%운동능력
Escherichia coli%QseC gene%Red recombination%Motility
目的 通过Red同源重组法构建qseC基因缺失的大肠杆菌突变株,探讨qseC基因对大肠杆菌运动能力的影响.方法 PCR扩增两翼与目的基因上下游同源、含有氯霉素抗性基因片段,电击转化入大肠杆菌MC1000,在Red同源重组酶作用下,用含同源臂的氯霉素抗性片段置换目的基因qseC,并利用FLP位点专一性重组将氯霉素抗性基因删除.测定qseC基因缺失株运动能力的变化.结果 qseC基因已被成功敲除.在LB培养基中,qseC基因缺陷株的生长状况与亲株无明显差异.MC1000与MC 1000qseC基因缺失株运动圆环的直径分别为(6.10±0.36) mrm和(3.20±0.53) mm (P＜0.01).结论 成功构建大肠杆菌qseC基因缺失突变株,且qseC基因对细菌运动能力具有重要调控作用.
目的 通過Red同源重組法構建qseC基因缺失的大腸桿菌突變株,探討qseC基因對大腸桿菌運動能力的影響.方法 PCR擴增兩翼與目的基因上下遊同源、含有氯黴素抗性基因片段,電擊轉化入大腸桿菌MC1000,在Red同源重組酶作用下,用含同源臂的氯黴素抗性片段置換目的基因qseC,併利用FLP位點專一性重組將氯黴素抗性基因刪除.測定qseC基因缺失株運動能力的變化.結果 qseC基因已被成功敲除.在LB培養基中,qseC基因缺陷株的生長狀況與親株無明顯差異.MC1000與MC 1000qseC基因缺失株運動圓環的直徑分彆為(6.10±0.36) mrm和(3.20±0.53) mm (P＜0.01).結論 成功構建大腸桿菌qseC基因缺失突變株,且qseC基因對細菌運動能力具有重要調控作用.
목적 통과Red동원중조법구건qseC기인결실적대장간균돌변주,탐토qseC기인대대장간균운동능력적영향.방법 PCR확증량익여목적기인상하유동원、함유록매소항성기인편단,전격전화입대장간균MC1000,재Red동원중조매작용하,용함동원비적록매소항성편단치환목적기인qseC,병이용FLP위점전일성중조장록매소항성기인산제.측정qseC기인결실주운동능력적변화.결과 qseC기인이피성공고제.재LB배양기중,qseC기인결함주적생장상황여친주무명현차이.MC1000여MC 1000qseC기인결실주운동원배적직경분별위(6.10±0.36) mrm화(3.20±0.53) mm (P＜0.01).결론 성공구건대장간균qseC기인결실돌변주,차qseC기인대세균운동능력구유중요조공작용.
