西北民族大学学报（自然科学版）
西北民族大學學報（自然科學版）
서북민족대학학보（자연과학판）
JOURNAL OF NORTHWEST MINORITIES UNIVERSITY（NATURAL SCIENCE）
2014年
4期
57-63
,共7页
崔梦楠%李明生%张健%张磊%马素娟%龙仕和%靳冬武%冯玉萍
崔夢楠%李明生%張健%張磊%馬素娟%龍仕和%靳鼕武%馮玉萍
최몽남%리명생%장건%장뢰%마소연%룡사화%근동무%풍옥평
琼脂微球%微载体%细胞培养
瓊脂微毬%微載體%細胞培養
경지미구%미재체%세포배양
用4％的琼脂溶液作为水相,环己烷为油相,司盘-80为乳化剂,采用乳化分散法制备了琼脂微球,再通过化学交联法固化.用DEAE-HCl修饰了微球表面的电荷密度,并通过正交试验优化了改性工艺,最终制得细胞培养用琼脂微球.通过对比研究了Cytodex1微载体与琼脂微球的表征及细胞培养效果.结果显示,最优改性工艺为:加入微球2倍体积4.5 mol/L的NaOH溶液,再加入微球2倍体积2.5 mol/L的DEAE-HCl溶液,在搅拌状态下加热至60℃,密闭反应4h.最终制得琼脂微球表面电荷密度为4.00 mmol/100 g,与Cytodex1微载体的4.05 mmol/100g几乎相当.静置培养时,四种细胞在两种微球上的贴壁率和伸展性各有优劣.悬浮培养BHK-21细胞时,Cytodex1微载体表面出现一定程度的“空球”现象,而琼脂微球表面细胞较均匀地伸展.培养至120 h时,两种微球表面的细胞均达到4.5×107 cells.继续培养,Cytodex1表面的细胞数开始下降,而琼脂微球表面仍增殖至168 h时才开始下降.综上所述,自制琼脂微球具备作为细胞培养用材料的条件.
用4％的瓊脂溶液作為水相,環己烷為油相,司盤-80為乳化劑,採用乳化分散法製備瞭瓊脂微毬,再通過化學交聯法固化.用DEAE-HCl脩飾瞭微毬錶麵的電荷密度,併通過正交試驗優化瞭改性工藝,最終製得細胞培養用瓊脂微毬.通過對比研究瞭Cytodex1微載體與瓊脂微毬的錶徵及細胞培養效果.結果顯示,最優改性工藝為:加入微毬2倍體積4.5 mol/L的NaOH溶液,再加入微毬2倍體積2.5 mol/L的DEAE-HCl溶液,在攪拌狀態下加熱至60℃,密閉反應4h.最終製得瓊脂微毬錶麵電荷密度為4.00 mmol/100 g,與Cytodex1微載體的4.05 mmol/100g幾乎相噹.靜置培養時,四種細胞在兩種微毬上的貼壁率和伸展性各有優劣.懸浮培養BHK-21細胞時,Cytodex1微載體錶麵齣現一定程度的“空毬”現象,而瓊脂微毬錶麵細胞較均勻地伸展.培養至120 h時,兩種微毬錶麵的細胞均達到4.5×107 cells.繼續培養,Cytodex1錶麵的細胞數開始下降,而瓊脂微毬錶麵仍增殖至168 h時纔開始下降.綜上所述,自製瓊脂微毬具備作為細胞培養用材料的條件.
용4％적경지용액작위수상,배기완위유상,사반-80위유화제,채용유화분산법제비료경지미구,재통과화학교련법고화.용DEAE-HCl수식료미구표면적전하밀도,병통과정교시험우화료개성공예,최종제득세포배양용경지미구.통과대비연구료Cytodex1미재체여경지미구적표정급세포배양효과.결과현시,최우개성공예위:가입미구2배체적4.5 mol/L적NaOH용액,재가입미구2배체적2.5 mol/L적DEAE-HCl용액,재교반상태하가열지60℃,밀폐반응4h.최종제득경지미구표면전하밀도위4.00 mmol/100 g,여Cytodex1미재체적4.05 mmol/100g궤호상당.정치배양시,사충세포재량충미구상적첩벽솔화신전성각유우렬.현부배양BHK-21세포시,Cytodex1미재체표면출현일정정도적“공구”현상,이경지미구표면세포교균균지신전.배양지120 h시,량충미구표면적세포균체도4.5×107 cells.계속배양,Cytodex1표면적세포수개시하강,이경지미구표면잉증식지168 h시재개시하강.종상소술,자제경지미구구비작위세포배양용재료적조건.
