家畜生态学报
傢畜生態學報
가축생태학보
ACTA ECOLOGAE ANIMALIS DOMASTICI
2015年
3期
63-68
,共6页
施开创%邹联斌%胡杰%张步娴%莫胜兰%官家明%陈汉忠
施開創%鄒聯斌%鬍傑%張步嫻%莫勝蘭%官傢明%陳漢忠
시개창%추련빈%호걸%장보한%막성란%관가명%진한충
猪瘟病毒%猪繁殖与呼吸综合征病毒%多重TaqMan荧光定量RT-PCR
豬瘟病毒%豬繁殖與呼吸綜閤徵病毒%多重TaqMan熒光定量RT-PCR
저온병독%저번식여호흡종합정병독%다중TaqMan형광정량RT-PCR
classical swine fever virus (CSFV)%porcine reproductive and respiratory syndrome virus (PRRSV)%multiplex quantitative TaqMan real-time RT-PCR (multiplex qRT-PCR)
根据猪瘟病毒(CSFV)以及猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)基因组序列特点,设计3对特异性引物和3条TaqMan探针,经过反应条件的优化,建立了能同时检测并区分CSFV以及美洲型、欧洲型PRRSV的多重TaqMan荧光定量RT-PCR (qRT-PCR)方法.该方法具有特异性强、敏感性高、重复性好的特点,可以特异扩增CSFV和PRRSV,而与猪的其它常见病毒无交叉反应;对CSFV及美洲型、欧洲型PRRSV3种重组质粒标准品的检出下限均为2.68拷贝/μL;组内及组间重复试验的变异系数均小于1.5％.应用该方法对253份临床疑似样品进行检测,结果病原阳性106份,其中20份为CSFV阳性,86份为美洲型PRRSV阳性,11份为CSFV和美洲型PRRSV混合感染,未检测到欧洲型PRRSV.试验表明,研究建立的多重qRT-PCR方法可用于CSFV和PRRSV的快速鉴别检测及流行病学调查.
根據豬瘟病毒(CSFV)以及豬繁殖與呼吸綜閤徵病毒(PRRSV)基因組序列特點,設計3對特異性引物和3條TaqMan探針,經過反應條件的優化,建立瞭能同時檢測併區分CSFV以及美洲型、歐洲型PRRSV的多重TaqMan熒光定量RT-PCR (qRT-PCR)方法.該方法具有特異性彊、敏感性高、重複性好的特點,可以特異擴增CSFV和PRRSV,而與豬的其它常見病毒無交扠反應;對CSFV及美洲型、歐洲型PRRSV3種重組質粒標準品的檢齣下限均為2.68拷貝/μL;組內及組間重複試驗的變異繫數均小于1.5％.應用該方法對253份臨床疑似樣品進行檢測,結果病原暘性106份,其中20份為CSFV暘性,86份為美洲型PRRSV暘性,11份為CSFV和美洲型PRRSV混閤感染,未檢測到歐洲型PRRSV.試驗錶明,研究建立的多重qRT-PCR方法可用于CSFV和PRRSV的快速鑒彆檢測及流行病學調查.
근거저온병독(CSFV)이급저번식여호흡종합정병독(PRRSV)기인조서렬특점,설계3대특이성인물화3조TaqMan탐침,경과반응조건적우화,건립료능동시검측병구분CSFV이급미주형、구주형PRRSV적다중TaqMan형광정량RT-PCR (qRT-PCR)방법.해방법구유특이성강、민감성고、중복성호적특점,가이특이확증CSFV화PRRSV,이여저적기타상견병독무교차반응;대CSFV급미주형、구주형PRRSV3충중조질립표준품적검출하한균위2.68고패/μL;조내급조간중복시험적변이계수균소우1.5％.응용해방법대253빈림상의사양품진행검측,결과병원양성106빈,기중20빈위CSFV양성,86빈위미주형PRRSV양성,11빈위CSFV화미주형PRRSV혼합감염,미검측도구주형PRRSV.시험표명,연구건립적다중qRT-PCR방법가용우CSFV화PRRSV적쾌속감별검측급류행병학조사.
