中国抗生素杂志
中國抗生素雜誌
중국항생소잡지
CHINESE JOURNAL OF ANTIBIOTICS
2015年
5期
330-333
,共4页
Ⅰ-SceⅠ内切酶%东方拟无枝酸菌%ECO-0501%hemA2
Ⅰ-SceⅠ內切酶%東方擬無枝痠菌%ECO-0501%hemA2
Ⅰ-SceⅠ내절매%동방의무지산균%ECO-0501%hemA2
Ⅰ-SceⅠ endonuclease%Amycolatopsis orientalis%ECO-0501%hemA2
目的 在东方拟无枝酸菌中建立由Ⅰ-SceⅠ介导的无标记高效重组系统.方法 首先构建可用于东方拟无枝酸菌的Ⅰ-SceⅠ操作盒,通过敲除多烯类化合物ECO-0501合成相关基因hemA2,比较操作盒使用前后获得hemA2基因双交换突变株的效率.结果 在没有引入Ⅰ-SceⅠ的情况下,随机重组的发生几率仅约2%,而导入后,由于Ⅰ-SceⅠ酶对引入DNA位点的双链切割,导致双交换重组的发生率提高至90%以上.结论 Ⅰ-SceⅠ系统是一种可用于东方拟无枝酸菌无标记遗传操作的有效工具.
目的 在東方擬無枝痠菌中建立由Ⅰ-SceⅠ介導的無標記高效重組繫統.方法 首先構建可用于東方擬無枝痠菌的Ⅰ-SceⅠ操作盒,通過敲除多烯類化閤物ECO-0501閤成相關基因hemA2,比較操作盒使用前後穫得hemA2基因雙交換突變株的效率.結果 在沒有引入Ⅰ-SceⅠ的情況下,隨機重組的髮生幾率僅約2%,而導入後,由于Ⅰ-SceⅠ酶對引入DNA位點的雙鏈切割,導緻雙交換重組的髮生率提高至90%以上.結論 Ⅰ-SceⅠ繫統是一種可用于東方擬無枝痠菌無標記遺傳操作的有效工具.
목적 재동방의무지산균중건립유Ⅰ-SceⅠ개도적무표기고효중조계통.방법 수선구건가용우동방의무지산균적Ⅰ-SceⅠ조작합,통과고제다희류화합물ECO-0501합성상관기인hemA2,비교조작합사용전후획득hemA2기인쌍교환돌변주적효솔.결과 재몰유인입Ⅰ-SceⅠ적정황하,수궤중조적발생궤솔부약2%,이도입후,유우Ⅰ-SceⅠ매대인입DNA위점적쌍련절할,도치쌍교환중조적발생솔제고지90%이상.결론 Ⅰ-SceⅠ계통시일충가용우동방의무지산균무표기유전조작적유효공구.