中国计划生育学杂志
中國計劃生育學雜誌
중국계화생육학잡지
CHINESE JOURNAL OF FAMILY PLANNING
2015年
5期
299-304
,共6页
焦延娜%李建辉%高小博%骆海燕%马旭%陆彩玲
焦延娜%李建輝%高小博%駱海燕%馬旭%陸綵玲
초연나%리건휘%고소박%락해연%마욱%륙채령
N-乙酰半胱氨酸%亚砷酸钠%H9C2心肌细胞%细胞凋亡%细胞自噬
N-乙酰半胱氨痠%亞砷痠鈉%H9C2心肌細胞%細胞凋亡%細胞自噬
N-을선반광안산%아신산납%H9C2심기세포%세포조망%세포자서
N-acetylcysteine%Sodium arsenite%H9C2 cardiac cell%Apoptosis%Autophagy
目的:探讨N-乙酰半胱氨酸(NAC)抑制亚砷酸钠诱导H9C2细胞凋亡和自噬作用及机制.方法:用亚砷酸钠诱导H9C2细胞构建凋亡和自噬模型.采用CCK-8比色法检测细胞的存活率,Hoechst 33258核染色法观察凋亡细胞的形态和数量改变,双氯荧光素染色法检测细胞内活性氧(ROS)水平,Western Blot法测定蛋白P53、Bcl-2、Bax及LC3的表达水平,以及磷酸化ERK1/2蛋白及ERK1/2蛋白总量的表达水平.结果:与对照组相比,15μM亚砷酸钠处理的H9C2细胞存活率显著降低,细胞内ROS水平明显增加,凋亡细胞数量明显增多,自噬标志蛋白LC3-Ⅱ与LC3-Ⅰ比值明显增大(P＜0.01).1 mM NAC预处理后显著减少H9C2细胞内ROS的生成和促凋亡蛋白P53和Bax的表达,诱导抗凋亡蛋白Bcl-2表达升高,同时降低自噬相关蛋白LC3-Ⅱ与LC3-Ⅰ的比值.亚砷酸钠处理诱导ERK1/2蛋白磷酸化(P＜0.01),而NAC和亚砷酸钠共处理抑制了ERK1/2蛋白的磷酸化.结论:亚砷酸钠降低H9C2细胞的存活率,增加细胞内ROS的生成,诱导细胞凋亡和自噬.NAC通过降低H9C2细胞内的ROS水平和抑制ERK1/2蛋白的磷酸化拮抗亚砷酸钠诱导的细胞凋亡和自噬.
目的:探討N-乙酰半胱氨痠(NAC)抑製亞砷痠鈉誘導H9C2細胞凋亡和自噬作用及機製.方法:用亞砷痠鈉誘導H9C2細胞構建凋亡和自噬模型.採用CCK-8比色法檢測細胞的存活率,Hoechst 33258覈染色法觀察凋亡細胞的形態和數量改變,雙氯熒光素染色法檢測細胞內活性氧(ROS)水平,Western Blot法測定蛋白P53、Bcl-2、Bax及LC3的錶達水平,以及燐痠化ERK1/2蛋白及ERK1/2蛋白總量的錶達水平.結果:與對照組相比,15μM亞砷痠鈉處理的H9C2細胞存活率顯著降低,細胞內ROS水平明顯增加,凋亡細胞數量明顯增多,自噬標誌蛋白LC3-Ⅱ與LC3-Ⅰ比值明顯增大(P＜0.01).1 mM NAC預處理後顯著減少H9C2細胞內ROS的生成和促凋亡蛋白P53和Bax的錶達,誘導抗凋亡蛋白Bcl-2錶達升高,同時降低自噬相關蛋白LC3-Ⅱ與LC3-Ⅰ的比值.亞砷痠鈉處理誘導ERK1/2蛋白燐痠化(P＜0.01),而NAC和亞砷痠鈉共處理抑製瞭ERK1/2蛋白的燐痠化.結論:亞砷痠鈉降低H9C2細胞的存活率,增加細胞內ROS的生成,誘導細胞凋亡和自噬.NAC通過降低H9C2細胞內的ROS水平和抑製ERK1/2蛋白的燐痠化拮抗亞砷痠鈉誘導的細胞凋亡和自噬.
목적:탐토N-을선반광안산(NAC)억제아신산납유도H9C2세포조망화자서작용급궤제.방법:용아신산납유도H9C2세포구건조망화자서모형.채용CCK-8비색법검측세포적존활솔,Hoechst 33258핵염색법관찰조망세포적형태화수량개변,쌍록형광소염색법검측세포내활성양(ROS)수평,Western Blot법측정단백P53、Bcl-2、Bax급LC3적표체수평,이급린산화ERK1/2단백급ERK1/2단백총량적표체수평.결과:여대조조상비,15μM아신산납처리적H9C2세포존활솔현저강저,세포내ROS수평명현증가,조망세포수량명현증다,자서표지단백LC3-Ⅱ여LC3-Ⅰ비치명현증대(P＜0.01).1 mM NAC예처리후현저감소H9C2세포내ROS적생성화촉조망단백P53화Bax적표체,유도항조망단백Bcl-2표체승고,동시강저자서상관단백LC3-Ⅱ여LC3-Ⅰ적비치.아신산납처리유도ERK1/2단백린산화(P＜0.01),이NAC화아신산납공처리억제료ERK1/2단백적린산화.결론:아신산납강저H9C2세포적존활솔,증가세포내ROS적생성,유도세포조망화자서.NAC통과강저H9C2세포내적ROS수평화억제ERK1/2단백적린산화길항아신산납유도적세포조망화자서.
