中华老年心脑血管病杂志
中華老年心腦血管病雜誌
중화노년심뇌혈관병잡지
CHINESE JOURNAL OF GERIATRIC CARDIOVASCULAR AND CEREBROVASCULAR DISEASES
2015年
5期
511-514
,共4页
苏迎%李龙%岳语喃%杨水祥
囌迎%李龍%嶽語喃%楊水祥
소영%리룡%악어남%양수상
心房颤动%萤光素类%微RNAs%转染%离子通道%质粒
心房顫動%螢光素類%微RNAs%轉染%離子通道%質粒
심방전동%형광소류%미RNAs%전염%리자통도%질립
atrial fibrillation%fluoresceins%microRNAs%transfection%ion channels%plasmids
目的 采用双荧光素酶报告基因分析微小RNA 1266(miR-1266)与心房颤动相关离子通道蛋白的靶向关系.方法 利用TargetScan、miRanda和miRDB数据库预测出miR-1266的4种靶基因,分别为电压门控钠通道α亚基(SCN5A)、电压门控钾通道eag相关H家族2型(KCNH2)、电压门控钾通道E家族β1亚基(KCNE1)和内向整流钾通道J家族5型(KCNJ5),并针对靶基因构建3'非编码区的重组荧光素酶报告质粒,4种靶基因(SCN5A、KCNH2、KCNE1和KCNJ5)分别分为miR-1266转染组、阴性对照组和空白对照组,miR-1266转染组和阴性对照组分别将SCN5A、KCNH2、KCNE1和KCNJ5的重组荧光素酶报告质粒与miR-1266及阴性对照质粒共转染于人胚肾HEK293细胞,48 h后检测各组荧光素酶活性.结果 SCN5A转染中,与阴性对照组比较,miR-1266转染组相对荧光素酶活性显著降低(o.100±0.007 vs 0.209±0.011,P=0.002);而KCNH2、KCNE1和KCNJ5转染中,与空白对照组和阴性对照组比较,miR 1266转柒组相对荧光素酶活性无明显变化(P=0.1269,0.0652,0.2326).结论 SCN5A是miR-1266的直接靶基因,而KCNH2、KCNE1和KCNJ5并非miR-1266的直接靶基因,miR-1266可能通过抑制SCN5A表达参与房颤电重构,有可能成为未来干预治疗靶点.
目的 採用雙熒光素酶報告基因分析微小RNA 1266(miR-1266)與心房顫動相關離子通道蛋白的靶嚮關繫.方法 利用TargetScan、miRanda和miRDB數據庫預測齣miR-1266的4種靶基因,分彆為電壓門控鈉通道α亞基(SCN5A)、電壓門控鉀通道eag相關H傢族2型(KCNH2)、電壓門控鉀通道E傢族β1亞基(KCNE1)和內嚮整流鉀通道J傢族5型(KCNJ5),併針對靶基因構建3'非編碼區的重組熒光素酶報告質粒,4種靶基因(SCN5A、KCNH2、KCNE1和KCNJ5)分彆分為miR-1266轉染組、陰性對照組和空白對照組,miR-1266轉染組和陰性對照組分彆將SCN5A、KCNH2、KCNE1和KCNJ5的重組熒光素酶報告質粒與miR-1266及陰性對照質粒共轉染于人胚腎HEK293細胞,48 h後檢測各組熒光素酶活性.結果 SCN5A轉染中,與陰性對照組比較,miR-1266轉染組相對熒光素酶活性顯著降低(o.100±0.007 vs 0.209±0.011,P=0.002);而KCNH2、KCNE1和KCNJ5轉染中,與空白對照組和陰性對照組比較,miR 1266轉柒組相對熒光素酶活性無明顯變化(P=0.1269,0.0652,0.2326).結論 SCN5A是miR-1266的直接靶基因,而KCNH2、KCNE1和KCNJ5併非miR-1266的直接靶基因,miR-1266可能通過抑製SCN5A錶達參與房顫電重構,有可能成為未來榦預治療靶點.
목적 채용쌍형광소매보고기인분석미소RNA 1266(miR-1266)여심방전동상관리자통도단백적파향관계.방법 이용TargetScan、miRanda화miRDB수거고예측출miR-1266적4충파기인,분별위전압문공납통도α아기(SCN5A)、전압문공갑통도eag상관H가족2형(KCNH2)、전압문공갑통도E가족β1아기(KCNE1)화내향정류갑통도J가족5형(KCNJ5),병침대파기인구건3'비편마구적중조형광소매보고질립,4충파기인(SCN5A、KCNH2、KCNE1화KCNJ5)분별분위miR-1266전염조、음성대조조화공백대조조,miR-1266전염조화음성대조조분별장SCN5A、KCNH2、KCNE1화KCNJ5적중조형광소매보고질립여miR-1266급음성대조질립공전염우인배신HEK293세포,48 h후검측각조형광소매활성.결과 SCN5A전염중,여음성대조조비교,miR-1266전염조상대형광소매활성현저강저(o.100±0.007 vs 0.209±0.011,P=0.002);이KCNH2、KCNE1화KCNJ5전염중,여공백대조조화음성대조조비교,miR 1266전칠조상대형광소매활성무명현변화(P=0.1269,0.0652,0.2326).결론 SCN5A시miR-1266적직접파기인,이KCNH2、KCNE1화KCNJ5병비miR-1266적직접파기인,miR-1266가능통과억제SCN5A표체삼여방전전중구,유가능성위미래간예치료파점.
