中国实验血液学杂志
中國實驗血液學雜誌
중국실험혈액학잡지
JOURNAL OF EXPERIMENTAL HEMATOLOGY
2015年
2期
490-494
,共5页
张加敏%冯非儿%王谦明%朱晓璐%王辰骢%裴博阳%张晓辉
張加敏%馮非兒%王謙明%硃曉璐%王辰驄%裴博暘%張曉輝
장가민%풍비인%왕겸명%주효로%왕신총%배박양%장효휘
HGF%慢病毒%骨髓损伤%ADSC
HGF%慢病毒%骨髓損傷%ADSC
HGF%만병독%골수손상%ADSC
HGF%lentivirus%bone marrow injury%ADSC
目的:本研究旨在构建携带人肝细胞生长因子(hepatocyte growth factor,HGF)基因的慢病毒载体,探索HGF慢病毒转染脂肪间充质干细胞(adipose derived mesenchymal stem cells,ADSC)的方法.方法:应用PCR法从带有HGF基因的质粒上钓取目的基因,克隆到GV287载体中.将重组GV287-HGF载体质粒和慢病毒包装质粒共转染293T细胞,测定病毒滴度,并转染ADSC.结果:HGF基因PCR产物电泳结果与预期大小一致,重组GV287-HGF质粒PCR产物电泳结果正确,酶切后产物测序分析所得结果与目的基因序列一致,含有HGF基因的重组慢病毒构建正确.通过ELISA法测得病毒滴度为5×108 TU/ml.HGF重组慢病毒转染ADSC的最佳感染复数(multiplicity of infection,MOI)值为50.结论:本研究构建表达人HGF的慢病毒载体并成功转染ADSC,为进一步研究过表达HGF的ADSC,治疗放射引起的骨髓及重要脏器损伤奠定基础.
目的:本研究旨在構建攜帶人肝細胞生長因子(hepatocyte growth factor,HGF)基因的慢病毒載體,探索HGF慢病毒轉染脂肪間充質榦細胞(adipose derived mesenchymal stem cells,ADSC)的方法.方法:應用PCR法從帶有HGF基因的質粒上釣取目的基因,剋隆到GV287載體中.將重組GV287-HGF載體質粒和慢病毒包裝質粒共轉染293T細胞,測定病毒滴度,併轉染ADSC.結果:HGF基因PCR產物電泳結果與預期大小一緻,重組GV287-HGF質粒PCR產物電泳結果正確,酶切後產物測序分析所得結果與目的基因序列一緻,含有HGF基因的重組慢病毒構建正確.通過ELISA法測得病毒滴度為5×108 TU/ml.HGF重組慢病毒轉染ADSC的最佳感染複數(multiplicity of infection,MOI)值為50.結論:本研究構建錶達人HGF的慢病毒載體併成功轉染ADSC,為進一步研究過錶達HGF的ADSC,治療放射引起的骨髓及重要髒器損傷奠定基礎.
목적:본연구지재구건휴대인간세포생장인자(hepatocyte growth factor,HGF)기인적만병독재체,탐색HGF만병독전염지방간충질간세포(adipose derived mesenchymal stem cells,ADSC)적방법.방법:응용PCR법종대유HGF기인적질립상조취목적기인,극륭도GV287재체중.장중조GV287-HGF재체질립화만병독포장질립공전염293T세포,측정병독적도,병전염ADSC.결과:HGF기인PCR산물전영결과여예기대소일치,중조GV287-HGF질립PCR산물전영결과정학,매절후산물측서분석소득결과여목적기인서렬일치,함유HGF기인적중조만병독구건정학.통과ELISA법측득병독적도위5×108 TU/ml.HGF중조만병독전염ADSC적최가감염복수(multiplicity of infection,MOI)치위50.결론:본연구구건표체인HGF적만병독재체병성공전염ADSC,위진일보연구과표체HGF적ADSC,치료방사인기적골수급중요장기손상전정기출.
