山西农业大学学报(自然科学版)
山西農業大學學報(自然科學版)
산서농업대학학보(자연과학판)
JOURNAL OF SHANXI AGRICULTURAL UNIVERSITY(NATURAL SCIENCE EDITION)
2015年
3期
236-240
,共5页
段国锋%李丽娟%王争争%刘群龙
段國鋒%李麗娟%王爭爭%劉群龍
단국봉%리려연%왕쟁쟁%류군룡
甜柿%SSR%PCR反应体系
甜柿%SSR%PCR反應體繫
첨시%SSR%PCR반응체계
PCNA%SSR%PCR reaction system
本试验采用正交试验设计法,对“阳丰”甜柿SSR-PCR体系中DNA模板浓度、MgCl2浓度、dNTPs浓度、引物、Taq酶用量等进行了优化,通过琼脂糖凝胶电泳对谱带进行分析,结果表明体系10为最佳体系:20 μL扩增反应体系中,25 mmol·L-1 MgCl2溶液1.4 μL,10 mmol·L-1 dNTPs混合液0.4μL,10 mmol·L-1引物1.1μL,5U·μL-1 Taq酶液0.4μL,10 ng·μL-1 DNA溶液4.0 μL.所有参试因素中Taq酶对“阳丰”甜柿SSR-PCR扩增结果影响最大,dNTPs对PCR结果影响最小.
本試驗採用正交試驗設計法,對“暘豐”甜柿SSR-PCR體繫中DNA模闆濃度、MgCl2濃度、dNTPs濃度、引物、Taq酶用量等進行瞭優化,通過瓊脂糖凝膠電泳對譜帶進行分析,結果錶明體繫10為最佳體繫:20 μL擴增反應體繫中,25 mmol·L-1 MgCl2溶液1.4 μL,10 mmol·L-1 dNTPs混閤液0.4μL,10 mmol·L-1引物1.1μL,5U·μL-1 Taq酶液0.4μL,10 ng·μL-1 DNA溶液4.0 μL.所有參試因素中Taq酶對“暘豐”甜柿SSR-PCR擴增結果影響最大,dNTPs對PCR結果影響最小.
본시험채용정교시험설계법,대“양봉”첨시SSR-PCR체계중DNA모판농도、MgCl2농도、dNTPs농도、인물、Taq매용량등진행료우화,통과경지당응효전영대보대진행분석,결과표명체계10위최가체계:20 μL확증반응체계중,25 mmol·L-1 MgCl2용액1.4 μL,10 mmol·L-1 dNTPs혼합액0.4μL,10 mmol·L-1인물1.1μL,5U·μL-1 Taq매액0.4μL,10 ng·μL-1 DNA용액4.0 μL.소유삼시인소중Taq매대“양봉”첨시SSR-PCR확증결과영향최대,dNTPs대PCR결과영향최소.