山西医科大学学报
山西醫科大學學報
산서의과대학학보
JOURNAL OF SHANXI MEDICAL UNIVERSITY
2015年
4期
327-330
,共4页
刘昀%孙秀珍%徐晶%吴媛媛%史红阳%方萍
劉昀%孫秀珍%徐晶%吳媛媛%史紅暘%方萍
류윤%손수진%서정%오원원%사홍양%방평
法国梧桐花粉%变应原%cDNA表达文库
法國梧桐花粉%變應原%cDNA錶達文庫
법국오동화분%변응원%cDNA표체문고
Platanus acerifolia pollen%allergen%cDNA expression library
目的 构建法国梧桐花粉变应原cDNA表达文库并初步鉴定. 方法 利用Trizol法抽提法国梧桐花粉总RNA,经过Oligo(dT)纤维素柱纯化后分离mRNA,反转录合成ds cDNA,连接EcoR Ⅰ接头,末端磷酸化,Xho Ⅰ消化,电泳分离并凝胶回收大于500 bp以上的cDNA片段,与Uni-ZAP XR Vector连接,经过体外包装,感染宿主菌,构建cDNA文库,检测文库容量和重组率,并采用PCR方法对插入的cDNA片段大小进行分析. 结果 成功构建了一个文库容量为3.5×106 pfu/ml,重组率为94％,平均插入片段长度约为0.7 kb的法国梧桐花粉变应原cDNA表达文库. 结论 所建文库容量及插入片段大小合适,适用于筛选目的cDNA,为进一步研究法国梧桐花粉主要变应原基因并制备重组标准化法国梧桐花粉主要变应原疫苗奠定基础.
目的 構建法國梧桐花粉變應原cDNA錶達文庫併初步鑒定. 方法 利用Trizol法抽提法國梧桐花粉總RNA,經過Oligo(dT)纖維素柱純化後分離mRNA,反轉錄閤成ds cDNA,連接EcoR Ⅰ接頭,末耑燐痠化,Xho Ⅰ消化,電泳分離併凝膠迴收大于500 bp以上的cDNA片段,與Uni-ZAP XR Vector連接,經過體外包裝,感染宿主菌,構建cDNA文庫,檢測文庫容量和重組率,併採用PCR方法對插入的cDNA片段大小進行分析. 結果 成功構建瞭一箇文庫容量為3.5×106 pfu/ml,重組率為94％,平均插入片段長度約為0.7 kb的法國梧桐花粉變應原cDNA錶達文庫. 結論 所建文庫容量及插入片段大小閤適,適用于篩選目的cDNA,為進一步研究法國梧桐花粉主要變應原基因併製備重組標準化法國梧桐花粉主要變應原疫苗奠定基礎.
목적 구건법국오동화분변응원cDNA표체문고병초보감정. 방법 이용Trizol법추제법국오동화분총RNA,경과Oligo(dT)섬유소주순화후분리mRNA,반전록합성ds cDNA,련접EcoR Ⅰ접두,말단린산화,Xho Ⅰ소화,전영분리병응효회수대우500 bp이상적cDNA편단,여Uni-ZAP XR Vector련접,경과체외포장,감염숙주균,구건cDNA문고,검측문고용량화중조솔,병채용PCR방법대삽입적cDNA편단대소진행분석. 결과 성공구건료일개문고용량위3.5×106 pfu/ml,중조솔위94％,평균삽입편단장도약위0.7 kb적법국오동화분변응원cDNA표체문고. 결론 소건문고용량급삽입편단대소합괄,괄용우사선목적cDNA,위진일보연구법국오동화분주요변응원기인병제비중조표준화법국오동화분주요변응원역묘전정기출.
