西南农业学报
西南農業學報
서남농업학보
SOUTHWEST CHINA JOURNAL OF AGRICULTURAL SCIENCES
2015年
2期
475-479
,共5页
余桂容%曹颖%杜文平%宋军%陈谦%徐利远
餘桂容%曹穎%杜文平%宋軍%陳謙%徐利遠
여계용%조영%두문평%송군%진겸%서리원
玉米幼胚%遗传转化%抗虫基因%抗除草剂基因
玉米幼胚%遺傳轉化%抗蟲基因%抗除草劑基因
옥미유배%유전전화%항충기인%항제초제기인
Maize callus%Genetic transformation%Insect resistance gene%Herbicide resistance gene
本研究对来自苏云金芽胞杆菌BT8的Cry1A(h)基因根据玉米密码子偏好性进行了优化.采用重叠PCR方法获得了优化的CrylAh基因与抗除草剂基因2mG2-epsps融合片段,并将其构建到植物表达载体pBIl21上,构建pBI121-EPSPS-crylAh双元载体.将其转化根癌农杆菌菌株EHA105,获得基因工程菌.结果表明,玉米生产上使用的骨干优良自交系18599、综31等的幼胚作为转基因受体材料,以工程菌将抗虫抗除草剂双价基因转入上述玉米幼胚,经共培养、恢复、筛选、分化、生根、壮苗移栽等培养,苗期除草剂草甘膦涂抹,免疫试纸条检测、抗虫接种鉴定等初筛,再经PCR验证,获得了4株双抗转基因材料.此结果将为抗虫抗除草剂双抗转基因玉米新品种选育提供较好的亲本材料.
本研究對來自囌雲金芽胞桿菌BT8的Cry1A(h)基因根據玉米密碼子偏好性進行瞭優化.採用重疊PCR方法穫得瞭優化的CrylAh基因與抗除草劑基因2mG2-epsps融閤片段,併將其構建到植物錶達載體pBIl21上,構建pBI121-EPSPS-crylAh雙元載體.將其轉化根癌農桿菌菌株EHA105,穫得基因工程菌.結果錶明,玉米生產上使用的骨榦優良自交繫18599、綜31等的幼胚作為轉基因受體材料,以工程菌將抗蟲抗除草劑雙價基因轉入上述玉米幼胚,經共培養、恢複、篩選、分化、生根、壯苗移栽等培養,苗期除草劑草甘膦塗抹,免疫試紙條檢測、抗蟲接種鑒定等初篩,再經PCR驗證,穫得瞭4株雙抗轉基因材料.此結果將為抗蟲抗除草劑雙抗轉基因玉米新品種選育提供較好的親本材料.
본연구대래자소운금아포간균BT8적Cry1A(h)기인근거옥미밀마자편호성진행료우화.채용중첩PCR방법획득료우화적CrylAh기인여항제초제기인2mG2-epsps융합편단,병장기구건도식물표체재체pBIl21상,구건pBI121-EPSPS-crylAh쌍원재체.장기전화근암농간균균주EHA105,획득기인공정균.결과표명,옥미생산상사용적골간우량자교계18599、종31등적유배작위전기인수체재료,이공정균장항충항제초제쌍개기인전입상술옥미유배,경공배양、회복、사선、분화、생근、장묘이재등배양,묘기제초제초감련도말,면역시지조검측、항충접충감정등초사,재경PCR험증,획득료4주쌍항전기인재료.차결과장위항충항제초제쌍항전기인옥미신품충선육제공교호적친본재료.
