西北植物学报
西北植物學報
서북식물학보
ACTA BOTANICA BOREALI-OCCIDENTALIA SINICA
2015年
4期
688-693
,共6页
刘娜%曲延英%陈全家%倪志勇
劉娜%麯延英%陳全傢%倪誌勇
류나%곡연영%진전가%예지용
棉花%热激蛋白70%基因克隆%原核表达
棉花%熱激蛋白70%基因剋隆%原覈錶達
면화%열격단백70%기인극륭%원핵표체
cotton%heat shock protein 70%gene cloning%prokaryotic expression
以抗旱性较强的棉花品种‘KK1543’为材料,采用RT-PCR技术克隆了1个棉花HSP70基因,命名为GhHSP70.研究结果表明:GhHSP70基因开放阅读框长1 997 bp,编码648个氨基酸,GhHSP70蛋白相对分子量为70.94 kD,等电点为4.83.氨基酸序列比对和系统进化树分析发现,GhHSP70与欧洲大叶杨HSP70的亲缘关系最近,氨基酸序列一致性达到96.4％.为进一步分析基因的功能,构建原核表达载体pGEX-4T-1-GhHSP70,并在大肠杆菌中异源表达.SDS-PAGE分析表明所表达蛋白与预期蛋白大小一致,重组蛋白在37℃,o.2 mmol/LIPTG诱导2h时表达量最大.研究为进一步研究棉花HSP70基因功能奠定基础.
以抗旱性較彊的棉花品種‘KK1543’為材料,採用RT-PCR技術剋隆瞭1箇棉花HSP70基因,命名為GhHSP70.研究結果錶明:GhHSP70基因開放閱讀框長1 997 bp,編碼648箇氨基痠,GhHSP70蛋白相對分子量為70.94 kD,等電點為4.83.氨基痠序列比對和繫統進化樹分析髮現,GhHSP70與歐洲大葉楊HSP70的親緣關繫最近,氨基痠序列一緻性達到96.4％.為進一步分析基因的功能,構建原覈錶達載體pGEX-4T-1-GhHSP70,併在大腸桿菌中異源錶達.SDS-PAGE分析錶明所錶達蛋白與預期蛋白大小一緻,重組蛋白在37℃,o.2 mmol/LIPTG誘導2h時錶達量最大.研究為進一步研究棉花HSP70基因功能奠定基礎.
이항한성교강적면화품충‘KK1543’위재료,채용RT-PCR기술극륭료1개면화HSP70기인,명명위GhHSP70.연구결과표명:GhHSP70기인개방열독광장1 997 bp,편마648개안기산,GhHSP70단백상대분자량위70.94 kD,등전점위4.83.안기산서렬비대화계통진화수분석발현,GhHSP70여구주대협양HSP70적친연관계최근,안기산서렬일치성체도96.4％.위진일보분석기인적공능,구건원핵표체재체pGEX-4T-1-GhHSP70,병재대장간균중이원표체.SDS-PAGE분석표명소표체단백여예기단백대소일치,중조단백재37℃,o.2 mmol/LIPTG유도2h시표체량최대.연구위진일보연구면화HSP70기인공능전정기출.
