西北植物学报
西北植物學報
서북식물학보
ACTA BOTANICA BOREALI-OCCIDENTALIA SINICA
2015年
4期
639-645
,共7页
石淼%李艳军%刘永昌%张新宇%薛飞%孙杰
石淼%李豔軍%劉永昌%張新宇%薛飛%孫傑
석묘%리염군%류영창%장신우%설비%손걸
棉花%纤维%富含脯氨酸蛋白%BY-2烟草悬浮细胞
棉花%纖維%富含脯氨痠蛋白%BY-2煙草懸浮細胞
면화%섬유%부함포안산단백%BY-2연초현부세포
cotton%fiber%proline-rich protein%tobacco suspension BY-2 cells
利用电子序列拼接结合RT-PCR技术,从12DPA(开花后天数)棉纤维中克隆到1个编码富含脯氨酸蛋白(PRPs)基因,命名为GhPRP10(登录号KP036633).GhPRP10基因开放阅读框为684 bp,编码228个氨基酸,其中脯氨酸(Pro)含量为34.6%.序列分析发现GhPRP10蛋白具有N端信号肽和富含脯氨酸区域,属于第一类PRPs.实时荧光定量PCR(RT-PCR)结果显示,GhPRP10在棉纤维组织中优势表达,在纤维发育过程中的表达量呈现先升高后降低的趋势,在18DPA纤维中表达量最高.利用Gateway技术构建植物过量表达载体,转入烟草BY-2悬浮细胞,表型观察和细胞长度测量结果显示,转GhPRP10基因细胞比野生型细胞显著增长.根据该基因的组织表达特征和转基因细胞表型分析,推测GhPRP10基因在纤维伸长和次生壁合成过程中发挥作用.
利用電子序列拼接結閤RT-PCR技術,從12DPA(開花後天數)棉纖維中剋隆到1箇編碼富含脯氨痠蛋白(PRPs)基因,命名為GhPRP10(登錄號KP036633).GhPRP10基因開放閱讀框為684 bp,編碼228箇氨基痠,其中脯氨痠(Pro)含量為34.6%.序列分析髮現GhPRP10蛋白具有N耑信號肽和富含脯氨痠區域,屬于第一類PRPs.實時熒光定量PCR(RT-PCR)結果顯示,GhPRP10在棉纖維組織中優勢錶達,在纖維髮育過程中的錶達量呈現先升高後降低的趨勢,在18DPA纖維中錶達量最高.利用Gateway技術構建植物過量錶達載體,轉入煙草BY-2懸浮細胞,錶型觀察和細胞長度測量結果顯示,轉GhPRP10基因細胞比野生型細胞顯著增長.根據該基因的組織錶達特徵和轉基因細胞錶型分析,推測GhPRP10基因在纖維伸長和次生壁閤成過程中髮揮作用.
이용전자서렬병접결합RT-PCR기술,종12DPA(개화후천수)면섬유중극륭도1개편마부함포안산단백(PRPs)기인,명명위GhPRP10(등록호KP036633).GhPRP10기인개방열독광위684 bp,편마228개안기산,기중포안산(Pro)함량위34.6%.서렬분석발현GhPRP10단백구유N단신호태화부함포안산구역,속우제일류PRPs.실시형광정량PCR(RT-PCR)결과현시,GhPRP10재면섬유조직중우세표체,재섬유발육과정중적표체량정현선승고후강저적추세,재18DPA섬유중표체량최고.이용Gateway기술구건식물과량표체재체,전입연초BY-2현부세포,표형관찰화세포장도측량결과현시,전GhPRP10기인세포비야생형세포현저증장.근거해기인적조직표체특정화전기인세포표형분석,추측GhPRP10기인재섬유신장화차생벽합성과정중발휘작용.