CAJ | 학술논문

目的通过慢病毒介导发夹RNA(shRNA)干扰大鼠肺组织中结缔组织生长因子(CTGF)的表达,探索CTGF在百草枯(PQ)致肺纤维化中的作用.方法设计CTGF-shRNA的表达质粒,并与包装质粒共转染293FT细胞构建慢病毒;将80只SD雄性大鼠随机分成对照组、PQ组、无关序列组和干扰组4组,每组20只,PQ组、无关序列组、干扰组腹腔注射PQ 18 mg/kg,对照组给予等量生理盐水,处理4h后,无关序列组和干扰组分别向气道注入50μl慢病毒液,对照组和PQ组给予50μl生理盐水,各组于处理后7、14、28、56 d分别处死5只大鼠,检测大鼠肺组织CTGF表达以及肺纤维化指标的变化情况.结果 PQ组和无关序列组大鼠在染毒后行为和肺病理改变符合PQ中毒肺损伤的变化过程,两组各实验期CTGF表达量均高于同期对照组(P＜0.05),处理后7d开始升高,CTGF mRNA于28 d时表达量达峰值,而蛋白于56 d时表达量最高;PQ组和无关序列组肺羟脯氨酸值随着处理时间的延长而增加,与同期对照组相比,除14d外,差异均有统计学意义(P＜0.05);而干扰组各实验期CTGF的表达量均明显低于同期PQ组和无关序列组,差异有统计学意义(P＜0.05),其大鼠呼吸系统症状和肺病理损伤程度明显改善,肺羟脯氨酸值降低,处理后56 d肺羟脯氨酸值与PQ组和无关序列组相比,差异有统计学意义(P＜0.05).结论慢病毒介导的shRNA干扰能够有效抑制PQ致肺纤维化模型中CTGF的表达,减轻PQ致肺纤维化的程度.
목적 통과만병독개도발협RNA(shRNA)간우대서폐조직중결체조직생장인자(CTGF)적표체,탐색CTGF재백초고(PQ)치폐섬유화중적작용.방법 설계CTGF-shRNA적표체질립,병여포장질립공전염293FT세포구건만병독;장80지SD웅성대서수궤분성대조조、PQ조、무관서렬조화간우조4조,매조20지,PQ조、무관서렬조、간우조복강주사PQ 18 mg/kg,대조조급여등량생리염수,처리4h후,무관서렬조화간우조분별향기도주입50μl만병독액,대조조화PQ조급여50μl생리염수,각조우처리후7、14、28、56 d분별처사5지대서,검측대서폐조직CTGF표체이급폐섬유화지표적변화정황.결과 PQ조화무관서렬조대서재염독후행위화폐병리개변부합PQ중독폐손상적변화과정,량조각실험기CTGF표체량균고우동기대조조(P＜0.05),처리후7d개시승고,CTGF mRNA우28 d시표체량체봉치,이단백우56 d시표체량최고;PQ조화무관서렬조폐간포안산치수착처리시간적연장이증가,여동기대조조상비,제14d외,차이균유통계학의의(P＜0.05);이간우조각실험기CTGF적표체량균명현저우동기PQ조화무관서렬조,차이유통계학의의(P＜0.05),기대서호흡계통증상화폐병리손상정도명현개선,폐간포안산치강저,처리후56 d폐간포안산치여PQ조화무관서렬조상비,차이유통계학의의(P＜0.05).결론 만병독개도적shRNA간우능구유효억제PQ치폐섬유화모형중CTGF적표체,감경PQ치폐섬유화적정도.
@@