中成药
中成藥
중성약
CHINESE TRADITIONAL PATENT MEDICINE
2015年
5期
1114-1119
,共6页
韩莉%龚享文%杨钦河%闫海震%张玉佩%李媛媛%徐拥建%张金文%林春梅
韓莉%龔享文%楊欽河%閆海震%張玉珮%李媛媛%徐擁建%張金文%林春梅
한리%공향문%양흠하%염해진%장옥패%리원원%서옹건%장금문%림춘매
疏肝健脾方药%NF-κB通路%肝细胞、Kupffer细胞%LPS刺激%炎症损伤%含药血清
疏肝健脾方藥%NF-κB通路%肝細胞、Kupffer細胞%LPS刺激%炎癥損傷%含藥血清
소간건비방약%NF-κB통로%간세포、Kupffer세포%LPS자격%염증손상%함약혈청
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目的 基于核转录因子kappaB(nuclear transcription factor-kappaB,NF-κB)信号通路探讨脂多糖(lipopolysac-chandes,LPS)刺激大鼠肝细胞及Kupffer细胞炎症损伤以及疏肝健脾含药血清的保护作用.方法 通过体外培养以及免疫荧光鉴定SD大鼠肝细胞及Kupffer细胞,利用LPS刺激大鼠肝细胞及Kupffer细胞产生炎症反应,酶联免疫法检测肝细胞及Kupffer细胞培养上清液中白介素-1(interleukin-1,IL-1)、人血清淀粉样蛋白(serum amyloid A,SSA)的表达,Western blot法检测大鼠肝细胞及Kupffer细胞NF-κB通路相关蛋白的表达.结果 每只大鼠通过纯化后获得肝细胞数量1.5×108 ～2.0×108个,Kupffer细胞数量0.5×107～1.0×107个,Typan blue染色测定肝细胞及Kupffer细胞活力均可达到95％以上.LPS组肝细胞及Kupffer细胞较空白血清组IL-1、SSA水平均有显著升高(P＜0.01).而与LPS组比较,药物干预组可显著降低(P＜0.01).肝细胞、Kupffer细胞的蛋白表明,与空白血清组比较,LPS组肝细胞及Kupffer细胞NF-κB、IκB及磷酸化IKKβ蛋白表达均有显著升高(P＜0.01);与LPS组比较,疏肝健脾方药含药血清能显著下调肝细胞IκB及p-IKKβ蛋白的蛋白表达水平(P＜0.01),但NF-κB蛋白表达水平无显著差异(P＞0.05),疏肝健脾含药血清能下调Kupffer细胞NF-κB、IκB及p-IKKβ蛋白表达(P＜0.01).结论 疏肝健脾含药血清能够对LPS刺激大鼠肝细胞、Kupffer细胞炎症损伤产生保护作用,其机制可能与NF-κB信号通路相关.
目的 基于覈轉錄因子kappaB(nuclear transcription factor-kappaB,NF-κB)信號通路探討脂多糖(lipopolysac-chandes,LPS)刺激大鼠肝細胞及Kupffer細胞炎癥損傷以及疏肝健脾含藥血清的保護作用.方法 通過體外培養以及免疫熒光鑒定SD大鼠肝細胞及Kupffer細胞,利用LPS刺激大鼠肝細胞及Kupffer細胞產生炎癥反應,酶聯免疫法檢測肝細胞及Kupffer細胞培養上清液中白介素-1(interleukin-1,IL-1)、人血清澱粉樣蛋白(serum amyloid A,SSA)的錶達,Western blot法檢測大鼠肝細胞及Kupffer細胞NF-κB通路相關蛋白的錶達.結果 每隻大鼠通過純化後穫得肝細胞數量1.5×108 ～2.0×108箇,Kupffer細胞數量0.5×107～1.0×107箇,Typan blue染色測定肝細胞及Kupffer細胞活力均可達到95％以上.LPS組肝細胞及Kupffer細胞較空白血清組IL-1、SSA水平均有顯著升高(P＜0.01).而與LPS組比較,藥物榦預組可顯著降低(P＜0.01).肝細胞、Kupffer細胞的蛋白錶明,與空白血清組比較,LPS組肝細胞及Kupffer細胞NF-κB、IκB及燐痠化IKKβ蛋白錶達均有顯著升高(P＜0.01);與LPS組比較,疏肝健脾方藥含藥血清能顯著下調肝細胞IκB及p-IKKβ蛋白的蛋白錶達水平(P＜0.01),但NF-κB蛋白錶達水平無顯著差異(P＞0.05),疏肝健脾含藥血清能下調Kupffer細胞NF-κB、IκB及p-IKKβ蛋白錶達(P＜0.01).結論 疏肝健脾含藥血清能夠對LPS刺激大鼠肝細胞、Kupffer細胞炎癥損傷產生保護作用,其機製可能與NF-κB信號通路相關.
목적 기우핵전록인자kappaB(nuclear transcription factor-kappaB,NF-κB)신호통로탐토지다당(lipopolysac-chandes,LPS)자격대서간세포급Kupffer세포염증손상이급소간건비함약혈청적보호작용.방법 통과체외배양이급면역형광감정SD대서간세포급Kupffer세포,이용LPS자격대서간세포급Kupffer세포산생염증반응,매련면역법검측간세포급Kupffer세포배양상청액중백개소-1(interleukin-1,IL-1)、인혈청정분양단백(serum amyloid A,SSA)적표체,Western blot법검측대서간세포급Kupffer세포NF-κB통로상관단백적표체.결과 매지대서통과순화후획득간세포수량1.5×108 ～2.0×108개,Kupffer세포수량0.5×107～1.0×107개,Typan blue염색측정간세포급Kupffer세포활력균가체도95％이상.LPS조간세포급Kupffer세포교공백혈청조IL-1、SSA수평균유현저승고(P＜0.01).이여LPS조비교,약물간예조가현저강저(P＜0.01).간세포、Kupffer세포적단백표명,여공백혈청조비교,LPS조간세포급Kupffer세포NF-κB、IκB급린산화IKKβ단백표체균유현저승고(P＜0.01);여LPS조비교,소간건비방약함약혈청능현저하조간세포IκB급p-IKKβ단백적단백표체수평(P＜0.01),단NF-κB단백표체수평무현저차이(P＞0.05),소간건비함약혈청능하조Kupffer세포NF-κB、IκB급p-IKKβ단백표체(P＜0.01).결론 소간건비함약혈청능구대LPS자격대서간세포、Kupffer세포염증손상산생보호작용,기궤제가능여NF-κB신호통로상관.
