发酵科技通讯
髮酵科技通訊
발효과기통신
FAXIAO KEJI TONGXUN
2015年
2期
1-6
,共6页
糖基转移酶%纯化%酶学性质
糖基轉移酶%純化%酶學性質
당기전이매%순화%매학성질
将含重组质粒pET28b-ValG在BL21 (DE3)宿主菌中成功表达,以镍柱亲和层析、超滤脱盐及真空冷冻干燥结晶获得糖基转移酶并初步研究酶学性质.在10～40℃或pH 5～11下,该酶还能保持较好的稳定性,且最适反应温度及pH分别为30℃与8.0.1 mmol/L金属离子Ca2+、M2+、Mn2+、Co2+对酶反应有着显著的促进作用,而Cu2+、Zn2+对酶反应有强烈的抑制效果.当酶反应进程中酶活达到最大时,底物及产物的最适浓度分别为8 μmol/L与2μmol/L.以底物井冈羟胺A足量为前提,双倒数作图法表明KmB为35.275 μmol/L,Vm为0.153 μmol/(L·min),酶对井冈羟胺A的亲和力较尿苷二磷酸葡糖(UDPG)好,因此在全细胞酶催化过程中对提高UDPG供应量的研究是有必要的.
將含重組質粒pET28b-ValG在BL21 (DE3)宿主菌中成功錶達,以鎳柱親和層析、超濾脫鹽及真空冷凍榦燥結晶穫得糖基轉移酶併初步研究酶學性質.在10～40℃或pH 5～11下,該酶還能保持較好的穩定性,且最適反應溫度及pH分彆為30℃與8.0.1 mmol/L金屬離子Ca2+、M2+、Mn2+、Co2+對酶反應有著顯著的促進作用,而Cu2+、Zn2+對酶反應有彊烈的抑製效果.噹酶反應進程中酶活達到最大時,底物及產物的最適濃度分彆為8 μmol/L與2μmol/L.以底物井岡羥胺A足量為前提,雙倒數作圖法錶明KmB為35.275 μmol/L,Vm為0.153 μmol/(L·min),酶對井岡羥胺A的親和力較尿苷二燐痠葡糖(UDPG)好,因此在全細胞酶催化過程中對提高UDPG供應量的研究是有必要的.
장함중조질립pET28b-ValG재BL21 (DE3)숙주균중성공표체,이얼주친화층석、초려탈염급진공냉동간조결정획득당기전이매병초보연구매학성질.재10～40℃혹pH 5～11하,해매환능보지교호적은정성,차최괄반응온도급pH분별위30℃여8.0.1 mmol/L금속리자Ca2+、M2+、Mn2+、Co2+대매반응유착현저적촉진작용,이Cu2+、Zn2+대매반응유강렬적억제효과.당매반응진정중매활체도최대시,저물급산물적최괄농도분별위8 μmol/L여2μmol/L.이저물정강간알A족량위전제,쌍도수작도법표명KmB위35.275 μmol/L,Vm위0.153 μmol/(L·min),매대정강간알A적친화력교뇨감이린산포당(UDPG)호,인차재전세포매최화과정중대제고UDPG공응량적연구시유필요적.
