食品科学
食品科學
식품과학
FOOD SCIENCE
2015年
9期
117-124
,共8页
陈文拴%黄乾明%陈华萍%杨泽身%王安逸%苏光灿
陳文拴%黃乾明%陳華萍%楊澤身%王安逸%囌光燦
진문전%황건명%진화평%양택신%왕안일%소광찬
油橄榄%查尔酮合酶%查尔酮异构酶%基因克隆%序列分析
油橄欖%查爾酮閤酶%查爾酮異構酶%基因剋隆%序列分析
유감람%사이동합매%사이동이구매%기인극륭%서렬분석
Olea europaea%chalcone synthase (Chs)%chalcone isomerase (Chi)%gene cloning%sequence analysis
查尔酮合酶(chalcone synthase,Chs)与查尔酮异构酶(chalcone isomerase,Chi)是植物类黄酮合成代谢途径中的两个关键酶.采用同源克隆、反转录聚合酶链式反应(reverse transcription polymerase chain reaction,RT-PCR)、融合引物嵌套1CR(fusion primer and nested integrated PCR,FPNI-PCR)与3'-cDNA末端快速扩增技术(rapid amplification of cDNA end,RACE)相结合,分别克隆出油橄榄chs与chi基因全长.序列分析表明,油橄榄chs基因全长DNA(GenBank登录号:KF935223.1)和cDNA(GenBank登录号:KF935224.1)序列分别为2 085 bp 和1 173bp,该基因的开放阅读框(open reading frame,ORF)编码390个氨基酸,其氨基酸序列与葡萄和番茄全长Chs氨基酸序列的相似度在90％左右.生物信息学分析表明,该基因编码的蛋白属于Chs蛋白家族.油橄榄chi基因全长DNA(GenBank登录号:KF886190)和cDNA(GenBank登录号:KF886191)序列分别为1 373 bp和750 bp,其ORF编码249个氨基酸,该氨基酸序列与已报道的其他植物Chi氨基酸序列的相似度最高在65％左右,序列中包含一段由198个氨基酸残基组成的具有分子内裂解酶活性的功能域,符合Chi蛋白家族特征.
查爾酮閤酶(chalcone synthase,Chs)與查爾酮異構酶(chalcone isomerase,Chi)是植物類黃酮閤成代謝途徑中的兩箇關鍵酶.採用同源剋隆、反轉錄聚閤酶鏈式反應(reverse transcription polymerase chain reaction,RT-PCR)、融閤引物嵌套1CR(fusion primer and nested integrated PCR,FPNI-PCR)與3'-cDNA末耑快速擴增技術(rapid amplification of cDNA end,RACE)相結閤,分彆剋隆齣油橄欖chs與chi基因全長.序列分析錶明,油橄欖chs基因全長DNA(GenBank登錄號:KF935223.1)和cDNA(GenBank登錄號:KF935224.1)序列分彆為2 085 bp 和1 173bp,該基因的開放閱讀框(open reading frame,ORF)編碼390箇氨基痠,其氨基痠序列與葡萄和番茄全長Chs氨基痠序列的相似度在90％左右.生物信息學分析錶明,該基因編碼的蛋白屬于Chs蛋白傢族.油橄欖chi基因全長DNA(GenBank登錄號:KF886190)和cDNA(GenBank登錄號:KF886191)序列分彆為1 373 bp和750 bp,其ORF編碼249箇氨基痠,該氨基痠序列與已報道的其他植物Chi氨基痠序列的相似度最高在65％左右,序列中包含一段由198箇氨基痠殘基組成的具有分子內裂解酶活性的功能域,符閤Chi蛋白傢族特徵.
사이동합매(chalcone synthase,Chs)여사이동이구매(chalcone isomerase,Chi)시식물류황동합성대사도경중적량개관건매.채용동원극륭、반전록취합매련식반응(reverse transcription polymerase chain reaction,RT-PCR)、융합인물감투1CR(fusion primer and nested integrated PCR,FPNI-PCR)여3'-cDNA말단쾌속확증기술(rapid amplification of cDNA end,RACE)상결합,분별극륭출유감람chs여chi기인전장.서렬분석표명,유감람chs기인전장DNA(GenBank등록호:KF935223.1)화cDNA(GenBank등록호:KF935224.1)서렬분별위2 085 bp 화1 173bp,해기인적개방열독광(open reading frame,ORF)편마390개안기산,기안기산서렬여포도화번가전장Chs안기산서렬적상사도재90％좌우.생물신식학분석표명,해기인편마적단백속우Chs단백가족.유감람chi기인전장DNA(GenBank등록호:KF886190)화cDNA(GenBank등록호:KF886191)서렬분별위1 373 bp화750 bp,기ORF편마249개안기산,해안기산서렬여이보도적기타식물Chi안기산서렬적상사도최고재65％좌우,서렬중포함일단유198개안기산잔기조성적구유분자내렬해매활성적공능역,부합Chi단백가족특정.
