脊柱外科杂志
脊柱外科雜誌
척주외과잡지
JOURNAL OF SPINE SURGERY
2015年
2期
110-114
,共5页
王振飞%吴文坚%陈新用%梁裕
王振飛%吳文堅%陳新用%樑裕
왕진비%오문견%진신용%량유
大鼠%脊髓%再灌注损伤%基因表达%氧化性应激
大鼠%脊髓%再灌註損傷%基因錶達%氧化性應激
대서%척수%재관주손상%기인표체%양화성응격
Rats%Spinal cord%Reperfusion Injury%Gene Expression%Oxidative stress
目的 探讨SIRT2对大鼠脊髓缺血再灌注损伤(spinal cord ischemia-reperfusion injury,SCII)的神经保护作用.方法 实验分2部分,共54只SD雄性大鼠,第一部分实验动物共30只.应用逆转录聚合酶链反应(reverse transcription-polymerase chain reaction,RT-PCR)及Western blot检测脊髓组织SIRT2随再灌注时间改变mRNA水平及蛋白水平表达变化.其中24只实验动物分为4组:空白对照组,缺血lh再灌注后6h、12 h和24h组,每组6只.应用免疫荧光染色检测空白对照组及再灌注24 h组SIRT2表达及定位情况,实验大鼠共6只,每组3只.第二部分,SIRT2特异性抑制剂AGK-2的应用.将24只大鼠随机分为4组,进行4种不同处理,分别为假手术组(S组),DMSO组(P组),AGK-2 1 mmol/L组(T1组)、AGK-2 5 mmol/L组(T2组).分别评价缺血后大鼠运动功能和脊髓氧化应激水平.结果 再灌注6h,12h,24 h后,RT-PCR及Western blot结果显示随再灌注时间延长SIRT2基因及蛋白水平表达明显升高(P<0.05);行为学评分显示T2组神经损害更为严重(P<0.05),MDA水平T2组较S组明显升高,P组与T1组无明显差异.SOD活力与MDA水平相对应.结论 SIRT2随脊髓再灌注时间延长表达明显增加,表明SIRT2可能通过降低脊髓组织中的氧化应激水平减轻SCII.
目的 探討SIRT2對大鼠脊髓缺血再灌註損傷(spinal cord ischemia-reperfusion injury,SCII)的神經保護作用.方法 實驗分2部分,共54隻SD雄性大鼠,第一部分實驗動物共30隻.應用逆轉錄聚閤酶鏈反應(reverse transcription-polymerase chain reaction,RT-PCR)及Western blot檢測脊髓組織SIRT2隨再灌註時間改變mRNA水平及蛋白水平錶達變化.其中24隻實驗動物分為4組:空白對照組,缺血lh再灌註後6h、12 h和24h組,每組6隻.應用免疫熒光染色檢測空白對照組及再灌註24 h組SIRT2錶達及定位情況,實驗大鼠共6隻,每組3隻.第二部分,SIRT2特異性抑製劑AGK-2的應用.將24隻大鼠隨機分為4組,進行4種不同處理,分彆為假手術組(S組),DMSO組(P組),AGK-2 1 mmol/L組(T1組)、AGK-2 5 mmol/L組(T2組).分彆評價缺血後大鼠運動功能和脊髓氧化應激水平.結果 再灌註6h,12h,24 h後,RT-PCR及Western blot結果顯示隨再灌註時間延長SIRT2基因及蛋白水平錶達明顯升高(P<0.05);行為學評分顯示T2組神經損害更為嚴重(P<0.05),MDA水平T2組較S組明顯升高,P組與T1組無明顯差異.SOD活力與MDA水平相對應.結論 SIRT2隨脊髓再灌註時間延長錶達明顯增加,錶明SIRT2可能通過降低脊髓組織中的氧化應激水平減輕SCII.
목적 탐토SIRT2대대서척수결혈재관주손상(spinal cord ischemia-reperfusion injury,SCII)적신경보호작용.방법 실험분2부분,공54지SD웅성대서,제일부분실험동물공30지.응용역전록취합매련반응(reverse transcription-polymerase chain reaction,RT-PCR)급Western blot검측척수조직SIRT2수재관주시간개변mRNA수평급단백수평표체변화.기중24지실험동물분위4조:공백대조조,결혈lh재관주후6h、12 h화24h조,매조6지.응용면역형광염색검측공백대조조급재관주24 h조SIRT2표체급정위정황,실험대서공6지,매조3지.제이부분,SIRT2특이성억제제AGK-2적응용.장24지대서수궤분위4조,진행4충불동처리,분별위가수술조(S조),DMSO조(P조),AGK-2 1 mmol/L조(T1조)、AGK-2 5 mmol/L조(T2조).분별평개결혈후대서운동공능화척수양화응격수평.결과 재관주6h,12h,24 h후,RT-PCR급Western blot결과현시수재관주시간연장SIRT2기인급단백수평표체명현승고(P<0.05);행위학평분현시T2조신경손해경위엄중(P<0.05),MDA수평T2조교S조명현승고,P조여T1조무명현차이.SOD활력여MDA수평상대응.결론 SIRT2수척수재관주시간연장표체명현증가,표명SIRT2가능통과강저척수조직중적양화응격수평감경SCII.