上海交通大学学报（农业科学版）
上海交通大學學報（農業科學版）
상해교통대학학보（농업과학판）
JOURNAL OF SHANGHAI JIAOTONG UNIVERSITY(AGRICULTURAL SCIENCE)
2014年
6期
14-22
,共9页
百子莲%玻璃化法%超低温保存%钙离子分布
百子蓮%玻璃化法%超低溫保存%鈣離子分佈
백자련%파리화법%초저온보존%개리자분포
Agapanthus praecox%vitrification%cryopreservation%Ca2+ distribution
利用电镜细胞化学焦锑酸钾沉淀法及Ca2+荧光探针Fluo-3AM染色法,研究了玻璃化法超低温保存过程中预培养、装载、脱水和洗涤4个关键步骤对百子莲胚性愈伤组织细胞内Ca2+分布情况及浓度变化的影响.结果表明,在预培养后细胞液泡内Ca2+数量多于细胞质基质,Ca2+主要贴膜分布,且细胞内的Ca2+荧光强度降到最低值.经装载处理后,细胞内出现较多囊泡和淀粉粒,在线粒体和囊泡中观察到Ca2+数量增多,淀粉粒周围有较多的Ca2+分布,细胞内的荧光强度增加.经脱水处理后,细胞内的Ca2+荧光强度升高到最大值呈梯度分布,含有Ca2+的囊泡增多,细胞内淀粉粒周围的Ca2+数量较多.经洗涤处理后,随着细胞内玻璃化溶液的减少,细胞内Ca2+数量减少并且荧光强度降低,细胞质中Ca2+浓度回落到与对照相近的正常水平,淀粉粒数量增加但周围Ca2+分布较少.在超低温保存处理过程中,细胞经受包含低温、渗透、氧化等复合胁迫,Ca2+分布和浓度的变化可能对提高细胞低温抗性及抗氧化能力起到了一定作用.推测Ca2+的变化决定了植物细胞在超低温保存过程中对复合胁迫的不同适应能力,为优化百子莲胚性愈伤组织超低温保存体系提供了理论依据,为超低温保存过程中植物的细胞信号转导及生理调控机制提供一定的理论基础.
利用電鏡細胞化學焦銻痠鉀沉澱法及Ca2+熒光探針Fluo-3AM染色法,研究瞭玻璃化法超低溫保存過程中預培養、裝載、脫水和洗滌4箇關鍵步驟對百子蓮胚性愈傷組織細胞內Ca2+分佈情況及濃度變化的影響.結果錶明,在預培養後細胞液泡內Ca2+數量多于細胞質基質,Ca2+主要貼膜分佈,且細胞內的Ca2+熒光彊度降到最低值.經裝載處理後,細胞內齣現較多囊泡和澱粉粒,在線粒體和囊泡中觀察到Ca2+數量增多,澱粉粒週圍有較多的Ca2+分佈,細胞內的熒光彊度增加.經脫水處理後,細胞內的Ca2+熒光彊度升高到最大值呈梯度分佈,含有Ca2+的囊泡增多,細胞內澱粉粒週圍的Ca2+數量較多.經洗滌處理後,隨著細胞內玻璃化溶液的減少,細胞內Ca2+數量減少併且熒光彊度降低,細胞質中Ca2+濃度迴落到與對照相近的正常水平,澱粉粒數量增加但週圍Ca2+分佈較少.在超低溫保存處理過程中,細胞經受包含低溫、滲透、氧化等複閤脅迫,Ca2+分佈和濃度的變化可能對提高細胞低溫抗性及抗氧化能力起到瞭一定作用.推測Ca2+的變化決定瞭植物細胞在超低溫保存過程中對複閤脅迫的不同適應能力,為優化百子蓮胚性愈傷組織超低溫保存體繫提供瞭理論依據,為超低溫保存過程中植物的細胞信號轉導及生理調控機製提供一定的理論基礎.
이용전경세포화학초제산갑침정법급Ca2+형광탐침Fluo-3AM염색법,연구료파리화법초저온보존과정중예배양、장재、탈수화세조4개관건보취대백자련배성유상조직세포내Ca2+분포정황급농도변화적영향.결과표명,재예배양후세포액포내Ca2+수량다우세포질기질,Ca2+주요첩막분포,차세포내적Ca2+형광강도강도최저치.경장재처리후,세포내출현교다낭포화정분립,재선립체화낭포중관찰도Ca2+수량증다,정분립주위유교다적Ca2+분포,세포내적형광강도증가.경탈수처리후,세포내적Ca2+형광강도승고도최대치정제도분포,함유Ca2+적낭포증다,세포내정분립주위적Ca2+수량교다.경세조처리후,수착세포내파리화용액적감소,세포내Ca2+수량감소병차형광강도강저,세포질중Ca2+농도회락도여대조상근적정상수평,정분립수량증가단주위Ca2+분포교소.재초저온보존처리과정중,세포경수포함저온、삼투、양화등복합협박,Ca2+분포화농도적변화가능대제고세포저온항성급항양화능력기도료일정작용.추측Ca2+적변화결정료식물세포재초저온보존과정중대복합협박적불동괄응능력,위우화백자련배성유상조직초저온보존체계제공료이론의거,위초저온보존과정중식물적세포신호전도급생리조공궤제제공일정적이론기출.
