中山大学学报(医学科学版)
中山大學學報(醫學科學版)
중산대학학보(의학과학판)
JOURNAL OF SUN YAT-SEN UNIVERSITY(MEDICAL SCIENCES)
2015年
3期
360-365
,共6页
邵建立%李志忠%张瑕%林永新%孙国栋
邵建立%李誌忠%張瑕%林永新%孫國棟
소건립%리지충%장하%림영신%손국동
miR-210%脊髓神经元细胞%细胞凋亡%活性氧%NOX2
miR-210%脊髓神經元細胞%細胞凋亡%活性氧%NOX2
miR-210%척수신경원세포%세포조망%활성양%NOX2
miR-210%spinal cord neurons%cell apoptosis%ROS%NOX2
[目的]观察miR-210 inhibitor对大鼠背脊髓神经元细胞氧化应激的保护作用.[方法]体外培养大鼠背脊髓神经元细胞,随机分成正常组,H2O2组,H2O2联合miRNA Negative control组以及H2O2联合miR-210 inhibitor组.采用MTT法检测细胞的存活率,流式细胞仪检测细胞的凋亡率,活性氧检测试剂盒检测细胞内活性氧,Elisa检测NOX2.[结果]qPCR结果显示,100 μmol/L H2O2处理可导致大鼠背脊髓神经元细胞内miR-210表达量上升7.34倍;转染miR-210 inhibitor可明显抑制miR-210的表达量;MTT结果显示,抑制miR-210的表达可明显降低H2O2对大鼠背脊髓神经元细胞存活率的抑制作用;流式细胞仪检测发现抑制miR-210的表达可以明显阻止H2O2对大鼠背脊髓神经元细胞凋亡的诱导,显著降低凋亡率;进一步研究发现,转染miR-210 inhibitor可显著性降低H2O2诱导的细胞内NOX2和ROS的表达.[结论]H2O2刺激鼠脊髓神经元细胞导致细胞内miR-210表达的上调;降低miR-210的表达能够降低细胞内NOX2和ROS的表达,抑制NOX2/ROS通路从而减缓H2O2对大鼠背脊髓神经元细胞造成的损伤,推测miR-210可以作为脊髓损伤治疗的靶点.
[目的]觀察miR-210 inhibitor對大鼠揹脊髓神經元細胞氧化應激的保護作用.[方法]體外培養大鼠揹脊髓神經元細胞,隨機分成正常組,H2O2組,H2O2聯閤miRNA Negative control組以及H2O2聯閤miR-210 inhibitor組.採用MTT法檢測細胞的存活率,流式細胞儀檢測細胞的凋亡率,活性氧檢測試劑盒檢測細胞內活性氧,Elisa檢測NOX2.[結果]qPCR結果顯示,100 μmol/L H2O2處理可導緻大鼠揹脊髓神經元細胞內miR-210錶達量上升7.34倍;轉染miR-210 inhibitor可明顯抑製miR-210的錶達量;MTT結果顯示,抑製miR-210的錶達可明顯降低H2O2對大鼠揹脊髓神經元細胞存活率的抑製作用;流式細胞儀檢測髮現抑製miR-210的錶達可以明顯阻止H2O2對大鼠揹脊髓神經元細胞凋亡的誘導,顯著降低凋亡率;進一步研究髮現,轉染miR-210 inhibitor可顯著性降低H2O2誘導的細胞內NOX2和ROS的錶達.[結論]H2O2刺激鼠脊髓神經元細胞導緻細胞內miR-210錶達的上調;降低miR-210的錶達能夠降低細胞內NOX2和ROS的錶達,抑製NOX2/ROS通路從而減緩H2O2對大鼠揹脊髓神經元細胞造成的損傷,推測miR-210可以作為脊髓損傷治療的靶點.
[목적]관찰miR-210 inhibitor대대서배척수신경원세포양화응격적보호작용.[방법]체외배양대서배척수신경원세포,수궤분성정상조,H2O2조,H2O2연합miRNA Negative control조이급H2O2연합miR-210 inhibitor조.채용MTT법검측세포적존활솔,류식세포의검측세포적조망솔,활성양검측시제합검측세포내활성양,Elisa검측NOX2.[결과]qPCR결과현시,100 μmol/L H2O2처리가도치대서배척수신경원세포내miR-210표체량상승7.34배;전염miR-210 inhibitor가명현억제miR-210적표체량;MTT결과현시,억제miR-210적표체가명현강저H2O2대대서배척수신경원세포존활솔적억제작용;류식세포의검측발현억제miR-210적표체가이명현조지H2O2대대서배척수신경원세포조망적유도,현저강저조망솔;진일보연구발현,전염miR-210 inhibitor가현저성강저H2O2유도적세포내NOX2화ROS적표체.[결론]H2O2자격서척수신경원세포도치세포내miR-210표체적상조;강저miR-210적표체능구강저세포내NOX2화ROS적표체,억제NOX2/ROS통로종이감완H2O2대대서배척수신경원세포조성적손상,추측miR-210가이작위척수손상치료적파점.