中国生化药物杂志
中國生化藥物雜誌
중국생화약물잡지
CHINESE JOURNAL OF BIOCHEMICAL PHARMACEUTICS
2015年
5期
1-5
,共5页
张肖冰%李慧%王凤山%师以康
張肖冰%李慧%王鳳山%師以康
장초빙%리혜%왕봉산%사이강
O-GlcNAc糖基化%紫杉醇%N-乙酰氨基葡萄糖苷酶%N-乙酰氨基葡萄糖转移酶
O-GlcNAc糖基化%紫杉醇%N-乙酰氨基葡萄糖苷酶%N-乙酰氨基葡萄糖轉移酶
O-GlcNAc당기화%자삼순%N-을선안기포도당감매%N-을선안기포도당전이매
O-Glycosylation%Taxol%β-N-acetylglucosaminidase%β-N-acetylglucosaminyltransferase
目的：研究紫杉醇对乳腺瘤细胞蛋白质O－GlcNAc糖基化水平的影响及其机制，探讨蛋白质O－GlcNAc糖基化水平变化对紫杉醇抗肿瘤活性的影响。方法使用Western blot检测紫杉醇对乳腺癌细胞蛋白质O－GlcNAc糖基化水平及多种相关酶蛋白表达水平的影响；RT－qPCR检测紫杉醇对N－乙酰氨基葡萄糖苷酶（β－N－acetylglucosaminidase， OGA）和N－乙酰氨基葡萄糖转移酶（β－N－acetylglucosaminyltrans－fevase，OGT） mRNA水平的影响；采用OGA／OGT抑制剂PUGNAc／alloxan改变蛋白质O－GlcNAc糖基化水平，磺基罗丹明B法测定紫杉醇对肿瘤细胞增殖的影响。结果紫杉醇可诱导乳腺癌细胞MDA－MB－231蛋白质O－GlcNAc糖基化水平升高（P＜0．05），且具有时间和浓度依赖性；紫杉醇还可同时诱导OGA和OGT mRNA和蛋白水平的升高（P＜0．05），且具有浓度依赖性；采用OGA的抑制剂PUGNAc提高蛋白质O－GlcNAc糖基化水平后，细胞对紫杉醇的敏感性升高；采用OGT的抑制剂alloxan降低蛋白质O－GlcNAc糖基化水平后，细胞对紫杉醇的敏感性降低。结论紫杉醇可诱导蛋白质O－GlcNAc糖基化水平升高，蛋白质O－GlcNAc糖基化水平的改变也会影响乳腺癌细胞对紫杉醇的药物敏感性。
目的：研究紫杉醇對乳腺瘤細胞蛋白質O－GlcNAc糖基化水平的影響及其機製，探討蛋白質O－GlcNAc糖基化水平變化對紫杉醇抗腫瘤活性的影響。方法使用Western blot檢測紫杉醇對乳腺癌細胞蛋白質O－GlcNAc糖基化水平及多種相關酶蛋白錶達水平的影響；RT－qPCR檢測紫杉醇對N－乙酰氨基葡萄糖苷酶（β－N－acetylglucosaminidase， OGA）和N－乙酰氨基葡萄糖轉移酶（β－N－acetylglucosaminyltrans－fevase，OGT） mRNA水平的影響；採用OGA／OGT抑製劑PUGNAc／alloxan改變蛋白質O－GlcNAc糖基化水平，磺基囉丹明B法測定紫杉醇對腫瘤細胞增殖的影響。結果紫杉醇可誘導乳腺癌細胞MDA－MB－231蛋白質O－GlcNAc糖基化水平升高（P＜0．05），且具有時間和濃度依賴性；紫杉醇還可同時誘導OGA和OGT mRNA和蛋白水平的升高（P＜0．05），且具有濃度依賴性；採用OGA的抑製劑PUGNAc提高蛋白質O－GlcNAc糖基化水平後，細胞對紫杉醇的敏感性升高；採用OGT的抑製劑alloxan降低蛋白質O－GlcNAc糖基化水平後，細胞對紫杉醇的敏感性降低。結論紫杉醇可誘導蛋白質O－GlcNAc糖基化水平升高，蛋白質O－GlcNAc糖基化水平的改變也會影響乳腺癌細胞對紫杉醇的藥物敏感性。
목적：연구자삼순대유선류세포단백질O－GlcNAc당기화수평적영향급기궤제，탐토단백질O－GlcNAc당기화수평변화대자삼순항종류활성적영향。방법사용Western blot검측자삼순대유선암세포단백질O－GlcNAc당기화수평급다충상관매단백표체수평적영향；RT－qPCR검측자삼순대N－을선안기포도당감매（β－N－acetylglucosaminidase， OGA）화N－을선안기포도당전이매（β－N－acetylglucosaminyltrans－fevase，OGT） mRNA수평적영향；채용OGA／OGT억제제PUGNAc／alloxan개변단백질O－GlcNAc당기화수평，광기라단명B법측정자삼순대종류세포증식적영향。결과자삼순가유도유선암세포MDA－MB－231단백질O－GlcNAc당기화수평승고（P＜0．05），차구유시간화농도의뢰성；자삼순환가동시유도OGA화OGT mRNA화단백수평적승고（P＜0．05），차구유농도의뢰성；채용OGA적억제제PUGNAc제고단백질O－GlcNAc당기화수평후，세포대자삼순적민감성승고；채용OGT적억제제alloxan강저단백질O－GlcNAc당기화수평후，세포대자삼순적민감성강저。결론자삼순가유도단백질O－GlcNAc당기화수평승고，단백질O－GlcNAc당기화수평적개변야회영향유선암세포대자삼순적약물민감성。
Objective To study effect of Taxol on protein O-GlcNAcylation levels and investigate whether protein O-GlcNAcylation levels can affect the sensitivity of breast cancer cells to Taxol.Methods Western blot analysis was performed to examine protein O-GlcNAcylation levels and the expression of enzymes related to O-GlcNAcylation biosynthesis in Taxol treated breast cancer cells.RT-qPCR was used to analyze the effects of Taxol on OGA and OGT mRNA expression in cancer cells.The sulforhodamine B colorimetric assay was used to determine the effect of alteration of protein O-GlcNAcylation on the anti-proliferation of Taxol in breast cancer cells by adding OGA inhibitor and OGT inhibitor, respectively.Results Taxol treatment enhanced protein O-GlcNAcylation levels in dose-and time-dependent manners in breast cancer cell MDA-MB-231 ( P <0.05 ) .Taxol increased the mRNA levels of OGT and OGA after MDA-MB-231 cells were treated for 24 h(P<0.05).As OGA inhibitors increased protein O-GlcNAcylation levels, the sensitivity of MDA-MB-231 to Taxol was increased.As OGT inhibitor decreased protein O-GlcNAcylation levels, the sensitivity of MDA-MB-231 to Taxol was reduced.Conclusion Taxol treatment can enhance protein O-GlcNAcylation levels and the changes of O-GlcNAcylation levels alter the sensitivity of breast cancer cell MDA-MB-231 to Taxol.
