弓形虫表面抗原SAG2基因的克隆表达纯化及鉴定
궁형충표면항원SAG2기인적극륭표체순화급감정
Cloning, expression, purification and identification of Toxoplasma gondii SAG2 gene in Escherichia coli
  • 万方数据
    中国血吸虫病防治杂志 중국혈흡충병방치잡지
    CHINESE JOURNAL OF SCHISTOSOMIASIS CONTROL
    2015年 2期 170-173 ,共4页

    王卫艳%李瑾%魏庆宽%贾凤菊%肖婷%徐超%尹昆%黄炳成

    왕위염%리근%위경관%가봉국%초정%서초%윤곤%황병성

    刚地弓形虫%表面抗原2%基因克隆%融合蛋白%蛋白纯化 剛地弓形蟲%錶麵抗原2%基因剋隆%融閤蛋白%蛋白純化
    강지궁형충%표면항원2%기인극륭%융합단백%단백순화
    Toxoplasma gondii%Surface antigen 2%Gene clone%Fusion protein%Protein purification
    目的 构建弓形虫表面抗原2(SAG2)基因重组质粒并在大肠埃希菌中表达.方法 根据SAG2基因序列设计并合成引物,用PCR法从弓形虫基因组DNA中扩增SAG2基因片段,再克隆到pGEX-4T载体中,构建重组质粒.重组质粒经酶切鉴定并测序后,在大肠埃希菌BL21中诱导表达,产物经SDS-PAGE分析并纯化,以Western blotting分析其反应原性.结果 SAG2基因PCR产物大小约为561 bp,与预期相符.重组质粒经酶切及PCR鉴定构建成功,测序结果与已知序列吻合.重组质粒转化菌经IPTG诱导后表达的SAG2融合蛋白分子量约为47 ku,该蛋白可被GST标签抗体识别.结论 成功重组了弓形虫SAG2基因,表达蛋白具有反应原性.
    목적 구건궁형충표면항원2(SAG2)기인중조질립병재대장애희균중표체.방법 근거SAG2기인서렬설계병합성인물,용PCR법종궁형충기인조DNA중확증SAG2기인편단,재극륭도pGEX-4T재체중,구건중조질립.중조질립경매절감정병측서후,재대장애희균BL21중유도표체,산물경SDS-PAGE분석병순화,이Western blotting분석기반응원성.결과 SAG2기인PCR산물대소약위561 bp,여예기상부.중조질립경매절급PCR감정구건성공,측서결과여이지서렬문합.중조질립전화균경IPTG유도후표체적SAG2융합단백분자량약위47 ku,해단백가피GST표첨항체식별.결론 성공중조료궁형충SAG2기인,표체단백구유반응원성.
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