CAJ | 학술논문

目的建立肺孢子菌动物模型,并对肺孢子菌病原学和分子生物学检测技术进行研究.方法 SD和Wistar大鼠随机分为实验组和对照组,实验组大鼠皮下注射地塞米松,对照组皮下注射生理盐水.诱导8周后处死全部大鼠,收集其支气管肺泡灌洗液(BALF)和肺组织,分别做涂片和肺印片,染色后镜检.用FTA卡采集所有大鼠的BALF进行PCR检测.对PCR产物进行测序,利用BLAST软件将测序结果与GenBank数据库中的鼠源性肺孢子菌进行比对,确定菌种.结果共采集肺组织标本和BALF各34份,病原学检测显示实验组总感染率为29.2％ (7/24),对照组感染率为0;其中SD和Wistar大鼠实验组感染率分别为25.0％(3/12)和33.3％(4/12),差异无统计学意义(P=0.31);实验组SD大鼠肺印片和BALF肺孢子菌阳性检出率分别为25.0％(3/12)和16.7％(2/12),差异无统计学意义(P=0.34).实验组Wistar大鼠肺印片和BALF肺孢子菌阳性检出率分别33.3％(4/12)和16.7％(2/12),差异无统计学意义(P=0.24).用PCR方法共检测28份大鼠BALF样本,实验组阳性检出率为91.7％(26/28),对照组均为阴性.对PCR产物进行测序分析,发现其与GenBank已登录的大鼠源肺孢子菌(JX499145、GU133622、EF646865)的同源性均为100％.结论通过皮下注射地塞米松可以建立肺孢子菌动物模型,SD大鼠与Wistar大鼠在作为肺孢子菌动物模型的选择上无显著差别.在早期感染阶段,适宜用PCR法进行肺孢子菌检测,病原形态学检测漏检率高.
목적 건립폐포자균동물모형,병대폐포자균병원학화분자생물학검측기술진행연구.방법 SD화Wistar대서수궤분위실험조화대조조,실험조대서피하주사지새미송,대조조피하주사생리염수.유도8주후처사전부대서,수집기지기관폐포관세액(BALF)화폐조직,분별주도편화폐인편,염색후경검.용FTA잡채집소유대서적BALF진행PCR검측.대PCR산물진행측서,이용BLAST연건장측서결과여GenBank수거고중적서원성폐포자균진행비대,학정균충.결과 공채집폐조직표본화BALF각34빈,병원학검측현시실험조총감염솔위29.2％ (7/24),대조조감염솔위0;기중SD화Wistar대서실험조감염솔분별위25.0％(3/12)화33.3％(4/12),차이무통계학의의(P=0.31);실험조SD대서폐인편화BALF폐포자균양성검출솔분별위25.0％(3/12)화16.7％(2/12),차이무통계학의의(P=0.34).실험조Wistar대서폐인편화BALF폐포자균양성검출솔분별33.3％(4/12)화16.7％(2/12),차이무통계학의의(P=0.24).용PCR방법공검측28빈대서BALF양본,실험조양성검출솔위91.7％(26/28),대조조균위음성.대PCR산물진행측서분석,발현기여GenBank이등록적대서원폐포자균(JX499145、GU133622、EF646865)적동원성균위100％.결론 통과피하주사지새미송가이건립폐포자균동물모형,SD대서여Wistar대서재작위폐포자균동물모형적선택상무현저차별.재조기감염계단,괄의용PCR법진행폐포자균검측,병원형태학검측루검솔고.