中国中西医结合消化杂志
中國中西醫結閤消化雜誌
중국중서의결합소화잡지
CHINESE JOURNAL OF INTEGRATED TRADITIONAL AND WESTERN MEDICINE ON DIGESTION
2015年
5期
315-320
,共6页
梁伟%陈志霞%王慧君%王松坡
樑偉%陳誌霞%王慧君%王鬆坡
량위%진지하%왕혜군%왕송파
大肠癌%多药耐药%至真方%ERK通路%P-糖蛋白
大腸癌%多藥耐藥%至真方%ERK通路%P-糖蛋白
대장암%다약내약%지진방%ERK통로%P-당단백
Zhizhen Recipe%colorectal cancer%MDR%ERK
[目的]探讨至真方是否通过影响ERK通路活性,下调P-gp蛋白及ERK、MDR1 mRNA表达,逆转人大肠癌多药耐药细胞HCT 8/VCR多药耐药.[方法]细胞增殖-毒性检验CCK-8(cell counting kit 8)法鉴定HCT-8/VCR细胞株的多药耐药性及存活率;流式细胞仪测定细胞内罗丹明123(Rh123)的平均荧光强度;Real time PCR及Western blot检测ERK、p-ERK、P-gp的基因和蛋白的表达.[结果]HCT-8/VCR为多药耐药细胞;至真方含药血清可明显抑制HCT-8/VCR细胞生长;HCT-8/VCR细胞经8%、16%、32%至真方含药血清干预48 h后,细胞内Rh0123外排减少,波峰右移,细胞内荧光强度明显增强(P<0.01);HCT-8/VCR细胞ERK、MDR1 mRNA的表达水平均有所下降,且呈浓度依赖性;p-ERK表达较用药前(0.764±0.001)明显下降(P<0.01),分别为(0.513±0.002)、(0.498±0.001)、(0.471±0.12);ERK表达较用药前(0.771±0.204)分别下降至(0.437士0.004)、(0.413±0.002)、(0.398±0.001),(P<0.01).P-gp表达较用药前(0.94±0.014)下降至(0.701±0.01)、(0.663±0.01)、(0.508±0.02),(P<0.01).[结论]至真方可逆转人大肠癌多药耐药细胞株HCT-8/VCR的耐药作用,其机制与降低P-gp外排功能、降低ERK通路活性、下调P-gp蛋白及基因表达有关.
[目的]探討至真方是否通過影響ERK通路活性,下調P-gp蛋白及ERK、MDR1 mRNA錶達,逆轉人大腸癌多藥耐藥細胞HCT 8/VCR多藥耐藥.[方法]細胞增殖-毒性檢驗CCK-8(cell counting kit 8)法鑒定HCT-8/VCR細胞株的多藥耐藥性及存活率;流式細胞儀測定細胞內囉丹明123(Rh123)的平均熒光彊度;Real time PCR及Western blot檢測ERK、p-ERK、P-gp的基因和蛋白的錶達.[結果]HCT-8/VCR為多藥耐藥細胞;至真方含藥血清可明顯抑製HCT-8/VCR細胞生長;HCT-8/VCR細胞經8%、16%、32%至真方含藥血清榦預48 h後,細胞內Rh0123外排減少,波峰右移,細胞內熒光彊度明顯增彊(P<0.01);HCT-8/VCR細胞ERK、MDR1 mRNA的錶達水平均有所下降,且呈濃度依賴性;p-ERK錶達較用藥前(0.764±0.001)明顯下降(P<0.01),分彆為(0.513±0.002)、(0.498±0.001)、(0.471±0.12);ERK錶達較用藥前(0.771±0.204)分彆下降至(0.437士0.004)、(0.413±0.002)、(0.398±0.001),(P<0.01).P-gp錶達較用藥前(0.94±0.014)下降至(0.701±0.01)、(0.663±0.01)、(0.508±0.02),(P<0.01).[結論]至真方可逆轉人大腸癌多藥耐藥細胞株HCT-8/VCR的耐藥作用,其機製與降低P-gp外排功能、降低ERK通路活性、下調P-gp蛋白及基因錶達有關.
[목적]탐토지진방시부통과영향ERK통로활성,하조P-gp단백급ERK、MDR1 mRNA표체,역전인대장암다약내약세포HCT 8/VCR다약내약.[방법]세포증식-독성검험CCK-8(cell counting kit 8)법감정HCT-8/VCR세포주적다약내약성급존활솔;류식세포의측정세포내라단명123(Rh123)적평균형광강도;Real time PCR급Western blot검측ERK、p-ERK、P-gp적기인화단백적표체.[결과]HCT-8/VCR위다약내약세포;지진방함약혈청가명현억제HCT-8/VCR세포생장;HCT-8/VCR세포경8%、16%、32%지진방함약혈청간예48 h후,세포내Rh0123외배감소,파봉우이,세포내형광강도명현증강(P<0.01);HCT-8/VCR세포ERK、MDR1 mRNA적표체수평균유소하강,차정농도의뢰성;p-ERK표체교용약전(0.764±0.001)명현하강(P<0.01),분별위(0.513±0.002)、(0.498±0.001)、(0.471±0.12);ERK표체교용약전(0.771±0.204)분별하강지(0.437사0.004)、(0.413±0.002)、(0.398±0.001),(P<0.01).P-gp표체교용약전(0.94±0.014)하강지(0.701±0.01)、(0.663±0.01)、(0.508±0.02),(P<0.01).[결론]지진방가역전인대장암다약내약세포주HCT-8/VCR적내약작용,기궤제여강저P-gp외배공능、강저ERK통로활성、하조P-gp단백급기인표체유관.