畜牧与兽医
畜牧與獸醫
축목여수의
ANIMAL HUSBANDRY & VETERINARY MEDICINE
2015年
6期
115-118
,共4页
刘腾飞%田静%李会敏%余祖功
劉騰飛%田靜%李會敏%餘祖功
류등비%전정%리회민%여조공
成年鸡%肝细胞分离%半原位灌流法%原代培养
成年鷄%肝細胞分離%半原位灌流法%原代培養
성년계%간세포분리%반원위관류법%원대배양
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采用半原位灌流法,对40 ～ 50日龄的海蓝公鸡进行肝细胞分离,采用台盼蓝拒染法测定细胞总数并计算肝细胞实时存活率,肝细胞以5×105 mL的密度接种于6孔细胞培养板,每孔3 mL.在CO2培养箱中培养,观察细胞形态,测定不同培养阶段细胞培养上清液中LDH活力.结果显示每只鸡肝脏分离获得的细胞产量为(4.1±0.2) ×108个,肝细胞实时存活率为(95±1)％,培养48 h至144h,细胞上清液中LDH活力在低水平下保持稳定,细胞可维持良好的生长状态达7d以上.显示该方法可用于分离培养成年鸡肝细胞,分离培养的鸡肝脏细胞可用于研究细胞代谢、基因表达和肝细胞毒性.
採用半原位灌流法,對40 ～ 50日齡的海藍公鷄進行肝細胞分離,採用檯盼藍拒染法測定細胞總數併計算肝細胞實時存活率,肝細胞以5×105 mL的密度接種于6孔細胞培養闆,每孔3 mL.在CO2培養箱中培養,觀察細胞形態,測定不同培養階段細胞培養上清液中LDH活力.結果顯示每隻鷄肝髒分離穫得的細胞產量為(4.1±0.2) ×108箇,肝細胞實時存活率為(95±1)％,培養48 h至144h,細胞上清液中LDH活力在低水平下保持穩定,細胞可維持良好的生長狀態達7d以上.顯示該方法可用于分離培養成年鷄肝細胞,分離培養的鷄肝髒細胞可用于研究細胞代謝、基因錶達和肝細胞毒性.
채용반원위관류법,대40 ～ 50일령적해람공계진행간세포분리,채용태반람거염법측정세포총수병계산간세포실시존활솔,간세포이5×105 mL적밀도접충우6공세포배양판,매공3 mL.재CO2배양상중배양,관찰세포형태,측정불동배양계단세포배양상청액중LDH활력.결과현시매지계간장분리획득적세포산량위(4.1±0.2) ×108개,간세포실시존활솔위(95±1)％,배양48 h지144h,세포상청액중LDH활력재저수평하보지은정,세포가유지량호적생장상태체7d이상.현시해방법가용우분리배양성년계간세포,분리배양적계간장세포가용우연구세포대사、기인표체화간세포독성.
