畜牧与兽医
畜牧與獸醫
축목여수의
ANIMAL HUSBANDRY & VETERINARY MEDICINE
2015年
6期
54-59
,共6页
杨岳%袁海%龙筱晔%董宪君%翟丽娜%李永双%王长法
楊嶽%袁海%龍篠曄%董憲君%翟麗娜%李永雙%王長法
양악%원해%룡소엽%동헌군%적려나%리영쌍%왕장법
中国荷斯坦牛%C4A基因%5'侧翼区
中國荷斯坦牛%C4A基因%5'側翼區
중국하사탄우%C4A기인%5'측익구
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利用在线预测软件对牛C4A基因的5'侧翼区序列进行生物信息学分析,成功构建了一系列表达载体,利用双荧光素酶报告基因检测系统分析牛C4A基因的5'侧翼区启动活性.分别通过定点突变技术构建突变质粒,研究调控C4基本表达和诱导表达的转录因子结合位点.利用EM-SA技术验证转录因子在研究细胞系中存在与否.结果显示,C4A基因启动子序列转录起始位点上游169 bp为报告基因荧光值最高的片段,即为启动子核心区;其中SP1(-169 ～-158)、E-box(-122 ～-117)和AP-1(-80～-71)是调控C4基本表达的主要转录因子结合位点,且3个转录因子在HepG2细胞系中真实存在.
利用在線預測軟件對牛C4A基因的5'側翼區序列進行生物信息學分析,成功構建瞭一繫列錶達載體,利用雙熒光素酶報告基因檢測繫統分析牛C4A基因的5'側翼區啟動活性.分彆通過定點突變技術構建突變質粒,研究調控C4基本錶達和誘導錶達的轉錄因子結閤位點.利用EM-SA技術驗證轉錄因子在研究細胞繫中存在與否.結果顯示,C4A基因啟動子序列轉錄起始位點上遊169 bp為報告基因熒光值最高的片段,即為啟動子覈心區;其中SP1(-169 ～-158)、E-box(-122 ～-117)和AP-1(-80～-71)是調控C4基本錶達的主要轉錄因子結閤位點,且3箇轉錄因子在HepG2細胞繫中真實存在.
이용재선예측연건대우C4A기인적5'측익구서렬진행생물신식학분석,성공구건료일계렬표체재체,이용쌍형광소매보고기인검측계통분석우C4A기인적5'측익구계동활성.분별통과정점돌변기술구건돌변질립,연구조공C4기본표체화유도표체적전록인자결합위점.이용EM-SA기술험증전록인자재연구세포계중존재여부.결과현시,C4A기인계동자서렬전록기시위점상유169 bp위보고기인형광치최고적편단,즉위계동자핵심구;기중SP1(-169 ～-158)、E-box(-122 ～-117)화AP-1(-80～-71)시조공C4기본표체적주요전록인자결합위점,차3개전록인자재HepG2세포계중진실존재.
