CAJ | 학술논문

利用 cDNA 末端快速扩增法（RACE）克隆团头鲂 Megalobrama amblycephala 铁蛋白基因 cDNA 全长序列；同时研究经嗜水气单胞菌 Aeromonas hydrophila 攻毒后团头鲂肝组织中铁蛋白表达的变化，了解铁蛋白基因在团头鲂免疫应答中的作用。结果表明：团头鲂铁蛋白 cDNA 全长序列包括150bp 的5’末端序列（untranslated region，UTR），270bp 的3’UTR，以及522bp 编码174个氨基酸的开放阅读框（open reading frame，ORF）。这些氨基酸序列同其他鱼类铁蛋白 M 链氨基酸序列同源性较高。团头鲂铁蛋白基因在5’非编码区核甘酸序列124~154的位置有个特殊的结构，即铁反应元件（iron response element，IRE）。荧光定量 PCR 分析表明：铁蛋白基因在团头鲂肌肉、心脏、鳃、肝胰脏、脑和肾脏等组织器官中都有表达，在肝胰脏的表达量最高，脑组织表达量最低。经嗜水气单胞菌急性感染后，团头鲂肝胰脏组织中铁蛋白基因表达量显著上调。上述结果表明：团头鲂铁蛋白 M 亚基在团头鲂免疫应答过程中起重要作用。
이용 cDNA 말단쾌속확증법（RACE）극륭단두방 Megalobrama amblycephala 철단백기인 cDNA 전장서렬；동시연구경기수기단포균 Aeromonas hydrophila 공독후단두방간조직중철단백표체적변화，료해철단백기인재단두방면역응답중적작용。결과표명：단두방철단백 cDNA 전장서렬포괄150bp 적5’말단서렬（untranslated region，UTR），270bp 적3’UTR，이급522bp 편마174개안기산적개방열독광（open reading frame，ORF）。저사안기산서렬동기타어류철단백 M 련안기산서렬동원성교고。단두방철단백기인재5’비편마구핵감산서렬124~154적위치유개특수적결구，즉철반응원건（iron response element，IRE）。형광정량 PCR 분석표명：철단백기인재단두방기육、심장、새、간이장、뇌화신장등조직기관중도유표체，재간이장적표체량최고，뇌조직표체량최저。경기수기단포균급성감염후，단두방간이장조직중철단백기인표체량현저상조。상술결과표명：단두방철단백 M 아기재단두방면역응답과정중기중요작용。
A ferritin m iddle-chain(M )subunit,M aFerM ,w ascloned from bluntsnoutbream Megalobrama amblycephala by rapid am -plification ofD N A ends(R A C E).Itw asfound thatthe full-length cD N A ofM aFerM w as942 bp consisting ofa 5'-untranslated region (U TR)of150 bp,an open reading fram e(O R F)of522 bp and a 3'-U TR of270 bp.The O R F encoded a putative protein of174 am ino acids,w hich shared extensive sequence identities w ith the M ferritins of several fish species. The putative iron-response elem ents (IR Es)w ere observe atthe nucleotide sequence of124~154 position in the 5'-U TR offerritin.Fluorescence quantitative real-tim e re-verse transcription polym erase chain reaction analysisindicated thatthe m axim alM aFerM expression w asfound in the hepatopancreas and the m inim alin the brain and responded positively to experim entalchallenges w ith Aeromonas hydrophila.The findings indicate thatM aFerM isa functionalM ferritin and islikely to play a role in protection againstm icrobialinfection.