热带作物学报
熱帶作物學報
열대작물학보
CHINESE JOURNAL OF TROPICAL CROPS
2015年
5期
888-894
,共7页
魏利然%李辉亮%郭冬%杨子平%彭世清
魏利然%李輝亮%郭鼕%楊子平%彭世清
위리연%리휘량%곽동%양자평%팽세청
巴西橡胶树%MADS-box转录因子%原核表达%蛋白纯化
巴西橡膠樹%MADS-box轉錄因子%原覈錶達%蛋白純化
파서상효수%MADS-box전록인자%원핵표체%단백순화
Hevea brasiliensis%MADS-box transcription factor%Prokaryotic expression%Protein purification
为了探讨巴西橡胶树自根幼态无性系高产的分子机制,通过抑制缩减杂交获得了在巴西橡胶树自根幼态无性系和老态无性系胶乳中差异表达的基因片段.为进一步鉴定差异表达基因的功能,对相关基因进行克隆.通过RACE方法克隆一个新的橡胶树MADS-box转录因子基因(命名为Hb MA DS4),HbMA DS4全长984 bp,含有633 bp的阅读框,编码230个氨基酸.推测HbMADS4蛋白分子量为23.71 ku,等电点为7.61,在N端含有典型的MADS-box结构域.构建HbMADS4原核表达载体pHbMADS4,将其转化E.coli,经优化条件后,在20℃,0.1 mmol/L IPTG诱导4h的条件下,获得HbMADS4融合蛋白.Hb MA DS4的克隆和HbMADS4融合蛋白的获得为深入研究HbMADS4的功能奠定基础.
為瞭探討巴西橡膠樹自根幼態無性繫高產的分子機製,通過抑製縮減雜交穫得瞭在巴西橡膠樹自根幼態無性繫和老態無性繫膠乳中差異錶達的基因片段.為進一步鑒定差異錶達基因的功能,對相關基因進行剋隆.通過RACE方法剋隆一箇新的橡膠樹MADS-box轉錄因子基因(命名為Hb MA DS4),HbMA DS4全長984 bp,含有633 bp的閱讀框,編碼230箇氨基痠.推測HbMADS4蛋白分子量為23.71 ku,等電點為7.61,在N耑含有典型的MADS-box結構域.構建HbMADS4原覈錶達載體pHbMADS4,將其轉化E.coli,經優化條件後,在20℃,0.1 mmol/L IPTG誘導4h的條件下,穫得HbMADS4融閤蛋白.Hb MA DS4的剋隆和HbMADS4融閤蛋白的穫得為深入研究HbMADS4的功能奠定基礎.
위료탐토파서상효수자근유태무성계고산적분자궤제,통과억제축감잡교획득료재파서상효수자근유태무성계화로태무성계효유중차이표체적기인편단.위진일보감정차이표체기인적공능,대상관기인진행극륭.통과RACE방법극륭일개신적상효수MADS-box전록인자기인(명명위Hb MA DS4),HbMA DS4전장984 bp,함유633 bp적열독광,편마230개안기산.추측HbMADS4단백분자량위23.71 ku,등전점위7.61,재N단함유전형적MADS-box결구역.구건HbMADS4원핵표체재체pHbMADS4,장기전화E.coli,경우화조건후,재20℃,0.1 mmol/L IPTG유도4h적조건하,획득HbMADS4융합단백.Hb MA DS4적극륭화HbMADS4융합단백적획득위심입연구HbMADS4적공능전정기출.
