寄生虫与医学昆虫学报
寄生蟲與醫學昆蟲學報
기생충여의학곤충학보
ACTA PARASITOLOGICA ET MEDICA ENTOMOLOGICA SINICA
2015年
1期
18-23
,共6页
王文健%赵瑞君%李珀%杜斌%原发家%聂守民%程璟侠%李彦红
王文健%趙瑞君%李珀%杜斌%原髮傢%聶守民%程璟俠%李彥紅
왕문건%조서군%리박%두빈%원발가%섭수민%정경협%리언홍
家蝇%幼虫%抗菌肽%分离纯化%sup-b15%增殖抑制%诱导凋亡%对比研究
傢蠅%幼蟲%抗菌肽%分離純化%sup-b15%增殖抑製%誘導凋亡%對比研究
가승%유충%항균태%분리순화%sup-b15%증식억제%유도조망%대비연구
Antimicrobial peptides%Musca domestica%SUP-B15%Separation%Purification%Proliferation inhibition%Apoptosis
将家蝇三龄幼虫抗菌肽粗提物利用反相高效液相色谱仪( RP-HPLC)进行分离纯化,得到8种与对照组有差异的蛋白分别命名为I1、 I2、 I3、 I4、 G1、 G2、 G3、 G4组。通过CCK-8试剂盒检测发现,其中有4种蛋白及粗提物( E0组)对sup-b15细胞有增殖抑制作用,生存率均值分别为I1:0.714、 I2:0.785、I4:0.641、 G2:0.686、E0:0.561。采用流式细胞仪检测其诱导凋亡的效果,其凋亡率均值分别为I1:16.73、 I2:9.79、 I4:18.60、 G2:11.85、E0:35.94。对比发现,粗提物( E0)对sup-b15细胞的抑制率明显高于纯化物,证明粗提物较纯化物对肿瘤细胞抑杀作用更为明显,间接的说明各种纯化蛋白之间具有某些协同作用。
將傢蠅三齡幼蟲抗菌肽粗提物利用反相高效液相色譜儀( RP-HPLC)進行分離純化,得到8種與對照組有差異的蛋白分彆命名為I1、 I2、 I3、 I4、 G1、 G2、 G3、 G4組。通過CCK-8試劑盒檢測髮現,其中有4種蛋白及粗提物( E0組)對sup-b15細胞有增殖抑製作用,生存率均值分彆為I1:0.714、 I2:0.785、I4:0.641、 G2:0.686、E0:0.561。採用流式細胞儀檢測其誘導凋亡的效果,其凋亡率均值分彆為I1:16.73、 I2:9.79、 I4:18.60、 G2:11.85、E0:35.94。對比髮現,粗提物( E0)對sup-b15細胞的抑製率明顯高于純化物,證明粗提物較純化物對腫瘤細胞抑殺作用更為明顯,間接的說明各種純化蛋白之間具有某些協同作用。
장가승삼령유충항균태조제물이용반상고효액상색보의( RP-HPLC)진행분리순화,득도8충여대조조유차이적단백분별명명위I1、 I2、 I3、 I4、 G1、 G2、 G3、 G4조。통과CCK-8시제합검측발현,기중유4충단백급조제물( E0조)대sup-b15세포유증식억제작용,생존솔균치분별위I1:0.714、 I2:0.785、I4:0.641、 G2:0.686、E0:0.561。채용류식세포의검측기유도조망적효과,기조망솔균치분별위I1:16.73、 I2:9.79、 I4:18.60、 G2:11.85、E0:35.94。대비발현,조제물( E0)대sup-b15세포적억제솔명현고우순화물,증명조제물교순화물대종류세포억살작용경위명현,간접적설명각충순화단백지간구유모사협동작용。
Crude extracts of antimicrobial peptides from 3rd larva of Musca domestica was purified with reversed phase high performance liquid hromatography ( RP-HPLC ) .Total 8 active protein was harvested and the inhibition effect of sup-b15 cell proliferation was conducted by survival and apoptosis assays.Sup-b15 cell proliferation was inhibited significantly evidenced by the survival rate ranged from 0.561 to 0.785 and apoptosis rate ranged from 9.79 to 35.94.Crude extracts induced more great inhibition on sup-b15 cell proliferation than purified proteins, which suggested the unclear mechanism was involved.