医学分子生物学杂志
醫學分子生物學雜誌
의학분자생물학잡지
FOREIGN MEDICAL SCIENCES
2015年
3期
150-154,158
,共6页
张立新%余思茗%霍琳满%刘兴汉
張立新%餘思茗%霍琳滿%劉興漢
장립신%여사명%곽림만%류흥한
肿瘤抑素%基因重组%蛋白表达%抗肿瘤活性
腫瘤抑素%基因重組%蛋白錶達%抗腫瘤活性
종류억소%기인중조%단백표체%항종류활성
tumstatin%gene recombination%protein expression%anti-tumor activity
目的:构建肿瘤抑素41肽重组质粒,使其高效表达并纯化得到41肽,研究其抗肿瘤活性。方法人工设计并合成肿瘤抑素41肽基因序列,克隆到表达载体 pTYB21上,转化到大肠埃希菌 BL?21(DE3)中, IPTG诱导融合蛋白高效表达,几丁质亲和层析柱纯化后经Tricine?SDS?PAGE鉴定41肽。利用MTT法、吖啶橙/溴化乙锭( AO/EB)荧光染色、小鼠H22腹水型转移型肝癌实体瘤模型抑瘤实验并结合组织病理切片来研究肿瘤抑素41肽的生物学活性。结果构建肿瘤抑素41肽重组质粒,获得可溶性肿瘤抑素41肽。体外实验显示,41肽具有抑制人脐静脉内皮 HUVEC 细胞、人胃癌 HGC?27细胞和人肝癌HepG2细胞增殖和促进HUVEC、 HGC?27细胞凋亡的作用。体内实验显示,41肽对小鼠H22腹水型转移肝癌实体瘤生长具有明显的抑制作用,抑瘤率达到34?35%。结论成功构建了pTYB21?41肽重组质粒,肿瘤抑素41肽具有显著的抗肿瘤活性,为肿瘤抑素机制研究和临床应用研究奠定了基础。
目的:構建腫瘤抑素41肽重組質粒,使其高效錶達併純化得到41肽,研究其抗腫瘤活性。方法人工設計併閤成腫瘤抑素41肽基因序列,剋隆到錶達載體 pTYB21上,轉化到大腸埃希菌 BL?21(DE3)中, IPTG誘導融閤蛋白高效錶達,幾丁質親和層析柱純化後經Tricine?SDS?PAGE鑒定41肽。利用MTT法、吖啶橙/溴化乙錠( AO/EB)熒光染色、小鼠H22腹水型轉移型肝癌實體瘤模型抑瘤實驗併結閤組織病理切片來研究腫瘤抑素41肽的生物學活性。結果構建腫瘤抑素41肽重組質粒,穫得可溶性腫瘤抑素41肽。體外實驗顯示,41肽具有抑製人臍靜脈內皮 HUVEC 細胞、人胃癌 HGC?27細胞和人肝癌HepG2細胞增殖和促進HUVEC、 HGC?27細胞凋亡的作用。體內實驗顯示,41肽對小鼠H22腹水型轉移肝癌實體瘤生長具有明顯的抑製作用,抑瘤率達到34?35%。結論成功構建瞭pTYB21?41肽重組質粒,腫瘤抑素41肽具有顯著的抗腫瘤活性,為腫瘤抑素機製研究和臨床應用研究奠定瞭基礎。
목적:구건종류억소41태중조질립,사기고효표체병순화득도41태,연구기항종류활성。방법인공설계병합성종류억소41태기인서렬,극륭도표체재체 pTYB21상,전화도대장애희균 BL?21(DE3)중, IPTG유도융합단백고효표체,궤정질친화층석주순화후경Tricine?SDS?PAGE감정41태。이용MTT법、아정등/추화을정( AO/EB)형광염색、소서H22복수형전이형간암실체류모형억류실험병결합조직병리절편래연구종류억소41태적생물학활성。결과구건종류억소41태중조질립,획득가용성종류억소41태。체외실험현시,41태구유억제인제정맥내피 HUVEC 세포、인위암 HGC?27세포화인간암HepG2세포증식화촉진HUVEC、 HGC?27세포조망적작용。체내실험현시,41태대소서H22복수형전이간암실체류생장구유명현적억제작용,억류솔체도34?35%。결론성공구건료pTYB21?41태중조질립,종류억소41태구유현저적항종류활성,위종류억소궤제연구화림상응용연구전정료기출。