浙江农业学报
浙江農業學報
절강농업학보
ACTA AGRICULTURAE ZHEJIANGENSIS
2015年
5期
740-745
,共6页
蒋佳颖%王一成%杨孝朴%袁秀芳%李军星%徐丽华
蔣佳穎%王一成%楊孝樸%袁秀芳%李軍星%徐麗華
장가영%왕일성%양효박%원수방%리군성%서려화
猪α-干扰素%双抗体夹心ELISA%定量检测
豬α-榦擾素%雙抗體夾心ELISA%定量檢測
저α-간우소%쌍항체협심ELISA%정량검측
porcine α-interferon%double antibody sandwich ELISA%quantitative determination
为了能够准确测定猪血清中猪α-干扰素(PoIFN-αt)含量及猪α-干扰素制品的浓度,本研究以制备并经过亲和层析提纯的兔抗猪α-干扰素IgG多克隆抗体为包被抗体,以制备的鼠抗猪d-干扰素单克隆纯化抗体作为二抗,建立了测定猪α-干扰素浓度的双抗体夹心ELISA法(DAS-ELISA).通过条件优化,最佳兔抗猪α-干扰素IgG多克隆纯化抗体包被浓度为12.5 μg·mL-1,最佳鼠抗猪α-干扰素单克隆纯化抗体作用浓度为6.25 μg·mL-1,利用本实验室制备的已知浓度猪α-干扰素标准蛋白建立标准曲线,确定该方法检测猪α-干扰素浓度范围为0.0781 ～2.50 μg·mL-1.与Lowry法、冻干称量法测定猪α-干扰素浓度相比较,3种方法检测结果无显著差异,但所建立的双抗体夹心ELISA法能够检测血清中猪α-干扰素浓度,且方法简便.
為瞭能夠準確測定豬血清中豬α-榦擾素(PoIFN-αt)含量及豬α-榦擾素製品的濃度,本研究以製備併經過親和層析提純的兔抗豬α-榦擾素IgG多剋隆抗體為包被抗體,以製備的鼠抗豬d-榦擾素單剋隆純化抗體作為二抗,建立瞭測定豬α-榦擾素濃度的雙抗體夾心ELISA法(DAS-ELISA).通過條件優化,最佳兔抗豬α-榦擾素IgG多剋隆純化抗體包被濃度為12.5 μg·mL-1,最佳鼠抗豬α-榦擾素單剋隆純化抗體作用濃度為6.25 μg·mL-1,利用本實驗室製備的已知濃度豬α-榦擾素標準蛋白建立標準麯線,確定該方法檢測豬α-榦擾素濃度範圍為0.0781 ～2.50 μg·mL-1.與Lowry法、凍榦稱量法測定豬α-榦擾素濃度相比較,3種方法檢測結果無顯著差異,但所建立的雙抗體夾心ELISA法能夠檢測血清中豬α-榦擾素濃度,且方法簡便.
위료능구준학측정저혈청중저α-간우소(PoIFN-αt)함량급저α-간우소제품적농도,본연구이제비병경과친화층석제순적토항저α-간우소IgG다극륭항체위포피항체,이제비적서항저d-간우소단극륭순화항체작위이항,건립료측정저α-간우소농도적쌍항체협심ELISA법(DAS-ELISA).통과조건우화,최가토항저α-간우소IgG다극륭순화항체포피농도위12.5 μg·mL-1,최가서항저α-간우소단극륭순화항체작용농도위6.25 μg·mL-1,이용본실험실제비적이지농도저α-간우소표준단백건립표준곡선,학정해방법검측저α-간우소농도범위위0.0781 ～2.50 μg·mL-1.여Lowry법、동간칭량법측정저α-간우소농도상비교,3충방법검측결과무현저차이,단소건립적쌍항체협심ELISA법능구검측혈청중저α-간우소농도,차방법간편.
