植物保护
植物保護
식물보호
PLANT PROTECTION
2015年
3期
86-92
,共7页
朱琳峰%彭焕%黄文坤%张东升%孔令安%彭德良
硃琳峰%彭煥%黃文坤%張東升%孔令安%彭德良
주림봉%팽환%황문곤%장동승%공령안%팽덕량
抗草甘膦转基因大豆%Cp4-epsps%LAMP%快速检测
抗草甘膦轉基因大豆%Cp4-epsps%LAMP%快速檢測
항초감련전기인대두%Cp4-epsps%LAMP%쾌속검측
glyphosate-resistant soybean%Cp4-epsps%LAMP%rapid and simple detection
针对抗草甘膦转基因大豆的外源基因Cp4-epsps,建立了一种基于环介导等温扩增(loop-mediated isothermal amplification,LAMP)技术的抗草甘膦转基因大豆的检测体系,其扩增产物既可利用常规琼脂糖凝胶电泳检测,还可通过SYBR Green I染色进行快速检测.LAMP检测体系中dNTPs浓度为0.8mmol/L、Mg2+浓度为3 mmol/L、反应时间为45min时扩增效果最佳,其检测灵敏度为5μg/L,比常规PCR灵敏100倍.田间实际检测结果表明,LAMP检测结果和PCR检测结果完全一致,准确率为100％.本研究所建立的抗草甘膦转基因大豆LAMP检测方法具有简便快速、特异性强、灵敏度高等特征,是一种能够用于抗草甘膦转基因大豆检测、田间基因漂移监测和环境安全研究的有力工具.
針對抗草甘膦轉基因大豆的外源基因Cp4-epsps,建立瞭一種基于環介導等溫擴增(loop-mediated isothermal amplification,LAMP)技術的抗草甘膦轉基因大豆的檢測體繫,其擴增產物既可利用常規瓊脂糖凝膠電泳檢測,還可通過SYBR Green I染色進行快速檢測.LAMP檢測體繫中dNTPs濃度為0.8mmol/L、Mg2+濃度為3 mmol/L、反應時間為45min時擴增效果最佳,其檢測靈敏度為5μg/L,比常規PCR靈敏100倍.田間實際檢測結果錶明,LAMP檢測結果和PCR檢測結果完全一緻,準確率為100％.本研究所建立的抗草甘膦轉基因大豆LAMP檢測方法具有簡便快速、特異性彊、靈敏度高等特徵,是一種能夠用于抗草甘膦轉基因大豆檢測、田間基因漂移鑑測和環境安全研究的有力工具.
침대항초감련전기인대두적외원기인Cp4-epsps,건립료일충기우배개도등온확증(loop-mediated isothermal amplification,LAMP)기술적항초감련전기인대두적검측체계,기확증산물기가이용상규경지당응효전영검측,환가통과SYBR Green I염색진행쾌속검측.LAMP검측체계중dNTPs농도위0.8mmol/L、Mg2+농도위3 mmol/L、반응시간위45min시확증효과최가,기검측령민도위5μg/L,비상규PCR령민100배.전간실제검측결과표명,LAMP검측결과화PCR검측결과완전일치,준학솔위100％.본연구소건립적항초감련전기인대두LAMP검측방법구유간편쾌속、특이성강、령민도고등특정,시일충능구용우항초감련전기인대두검측、전간기인표이감측화배경안전연구적유력공구.
