植物保护
植物保護
식물보호
PLANT PROTECTION
2015年
3期
79-85
,共7页
张德珍%陈晓霞%高先悦%于金凤
張德珍%陳曉霞%高先悅%于金鳳
장덕진%진효하%고선열%우금봉
禾谷丝核菌%原生质体%制备%再生
禾穀絲覈菌%原生質體%製備%再生
화곡사핵균%원생질체%제비%재생
Rhizoctonia cerealis%protoplast%preparation%regeneration
禾谷丝核菌(Rhizoctonia cerealis)是引起我国小麦纹枯病的主要致病菌.为了建立高效稳定的禾谷丝核菌遗传转化体系,本试验比较研究了不同细胞壁降解酶、酶液浓度、酶处理温度和时间等因素对禾谷丝核菌原生质体制备的影响,利用正交设计试验优化了原生质体再生条件.结果表明,液体培养6d的菌丝,采用15 mg/mL溶壁酶+10 mg/mL蜗牛酶组成的混合酶液,30℃下酶解4h,可以获得较高的原生质体释放量,可达到3.0×106个/mL;禾谷丝核菌原生质体再生的最佳条件是以SuTC缓冲液作为渗透压稳定剂悬浮原生质体,采用单层混菌法接种于TB3再生培养基,原生质体再生率可达到58.6％.禾谷丝核菌原生质体制备和原生质体再生条件的优化,为深入研究禾谷丝核菌生长发育的分子遗传学基础和进一步探索小麦纹枯病的致病机理奠定了基础.
禾穀絲覈菌(Rhizoctonia cerealis)是引起我國小麥紋枯病的主要緻病菌.為瞭建立高效穩定的禾穀絲覈菌遺傳轉化體繫,本試驗比較研究瞭不同細胞壁降解酶、酶液濃度、酶處理溫度和時間等因素對禾穀絲覈菌原生質體製備的影響,利用正交設計試驗優化瞭原生質體再生條件.結果錶明,液體培養6d的菌絲,採用15 mg/mL溶壁酶+10 mg/mL蝸牛酶組成的混閤酶液,30℃下酶解4h,可以穫得較高的原生質體釋放量,可達到3.0×106箇/mL;禾穀絲覈菌原生質體再生的最佳條件是以SuTC緩遲液作為滲透壓穩定劑懸浮原生質體,採用單層混菌法接種于TB3再生培養基,原生質體再生率可達到58.6％.禾穀絲覈菌原生質體製備和原生質體再生條件的優化,為深入研究禾穀絲覈菌生長髮育的分子遺傳學基礎和進一步探索小麥紋枯病的緻病機理奠定瞭基礎.
화곡사핵균(Rhizoctonia cerealis)시인기아국소맥문고병적주요치병균.위료건립고효은정적화곡사핵균유전전화체계,본시험비교연구료불동세포벽강해매、매액농도、매처리온도화시간등인소대화곡사핵균원생질체제비적영향,이용정교설계시험우화료원생질체재생조건.결과표명,액체배양6d적균사,채용15 mg/mL용벽매+10 mg/mL와우매조성적혼합매액,30℃하매해4h,가이획득교고적원생질체석방량,가체도3.0×106개/mL;화곡사핵균원생질체재생적최가조건시이SuTC완충액작위삼투압은정제현부원생질체,채용단층혼균법접충우TB3재생배양기,원생질체재생솔가체도58.6％.화곡사핵균원생질체제비화원생질체재생조건적우화,위심입연구화곡사핵균생장발육적분자유전학기출화진일보탐색소맥문고병적치병궤리전정료기출.
