国际检验医学杂志
國際檢驗醫學雜誌
국제검험의학잡지
INTERNATIONAL JOURNAL OF LABORATORY MEDICINE
2015年
9期
1176-1178
,共3页
陈鑫%臧素纲%韩霜%王伟%汪晓莺%周玉贵
陳鑫%臧素綱%韓霜%王偉%汪曉鶯%週玉貴
진흠%장소강%한상%왕위%왕효앵%주옥귀
SYBR Green Ⅰ实时荧光定量PCR%微小RNA-124a%糖尿病
SYBR Green Ⅰ實時熒光定量PCR%微小RNA-124a%糖尿病
SYBR Green Ⅰ실시형광정량PCR%미소RNA-124a%당뇨병
SYBR Green Ⅰ real-time fluorescence quantitative PCR%microRNA-124a%diabetes mellitus
目的 建立ploy(A)聚合酶加尾的SYBR Green Ⅰ实时荧光定量PCR方法检测血清微小RNA(miR)-124a,并作临床初步应用.方法 用Trizol试剂提取血清总RNA.miR-124a ploy(A)聚合酶加尾逆转录获得cDNA,进行SYBR Green Ⅰ实时定量PCR扩增检测.制作C.elegans-miR-39模拟物浓度梯度稀释的标准曲线,定量血清中miR-124a的表达水平.结果 该方法能定量检测血清miR-124a表达水平,熔解曲线呈单峰,PCR扩增产物特异,在103～106 copies/uL范围内有良好的线性关系(r2 =0.999),并且检测重复性好.糖尿病患者血清中miR-124a表达水平明显高于健康体检者(P＜0.05).结论 所建立的ploy(A)聚合酶加尾SYBR Green Ⅰ实时荧光定量PCR方法能敏感、特异地检测血清中miR-124a的表达水平,为下一步临床应用的研究奠定了方法学基础.
目的 建立ploy(A)聚閤酶加尾的SYBR Green Ⅰ實時熒光定量PCR方法檢測血清微小RNA(miR)-124a,併作臨床初步應用.方法 用Trizol試劑提取血清總RNA.miR-124a ploy(A)聚閤酶加尾逆轉錄穫得cDNA,進行SYBR Green Ⅰ實時定量PCR擴增檢測.製作C.elegans-miR-39模擬物濃度梯度稀釋的標準麯線,定量血清中miR-124a的錶達水平.結果 該方法能定量檢測血清miR-124a錶達水平,鎔解麯線呈單峰,PCR擴增產物特異,在103～106 copies/uL範圍內有良好的線性關繫(r2 =0.999),併且檢測重複性好.糖尿病患者血清中miR-124a錶達水平明顯高于健康體檢者(P＜0.05).結論 所建立的ploy(A)聚閤酶加尾SYBR Green Ⅰ實時熒光定量PCR方法能敏感、特異地檢測血清中miR-124a的錶達水平,為下一步臨床應用的研究奠定瞭方法學基礎.
목적 건립ploy(A)취합매가미적SYBR Green Ⅰ실시형광정량PCR방법검측혈청미소RNA(miR)-124a,병작림상초보응용.방법 용Trizol시제제취혈청총RNA.miR-124a ploy(A)취합매가미역전록획득cDNA,진행SYBR Green Ⅰ실시정량PCR확증검측.제작C.elegans-miR-39모의물농도제도희석적표준곡선,정량혈청중miR-124a적표체수평.결과 해방법능정량검측혈청miR-124a표체수평,용해곡선정단봉,PCR확증산물특이,재103～106 copies/uL범위내유량호적선성관계(r2 =0.999),병차검측중복성호.당뇨병환자혈청중miR-124a표체수평명현고우건강체검자(P＜0.05).결론 소건립적ploy(A)취합매가미SYBR Green Ⅰ실시형광정량PCR방법능민감、특이지검측혈청중miR-124a적표체수평,위하일보림상응용적연구전정료방법학기출.
