中国病理生理杂志
中國病理生理雜誌
중국병리생리잡지
CHINESE JOURNAL OF PATHOPHYSIOLOGY
2015年
6期
1150-1152
,共3页
骨细胞%L型钙通道电流%穿孔全细胞膜片钳%β-七叶素
骨細胞%L型鈣通道電流%穿孔全細胞膜片鉗%β-七葉素
골세포%L형개통도전류%천공전세포막편겸%β-칠협소
KEY WORDS] Osteoblasts%L-type calcium current%Perforated whole-cell patch-clamp%β-escin
目的：探讨一种有效记录成骨细胞L型钙通道电流的穿孔全细胞膜片钳方法。此方法使玻璃电极与细胞内液保持电化学连续性，使细胞内环境保持稳定，改善常规全细胞膜片钳破膜造成的破膜难和封接不稳，以及常规全细胞膜片钳破膜后造成的封接不稳。方法：以成骨细胞为研究对象，采用β－七叶素穿孔全细胞膜片钳技术，记录骨细胞L型钙通道电流。结果：采用这种穿孔全细胞膜片钳技术，能有效记录到成骨细胞上L型钙通道电流。结论：穿孔膜片钳技术是一种简便而有效的记录全细胞电流的实验方法，该方法的建立为今后更深入的研究疾病中成骨细胞的病理生理机制提供实验基础。
目的：探討一種有效記錄成骨細胞L型鈣通道電流的穿孔全細胞膜片鉗方法。此方法使玻璃電極與細胞內液保持電化學連續性，使細胞內環境保持穩定，改善常規全細胞膜片鉗破膜造成的破膜難和封接不穩，以及常規全細胞膜片鉗破膜後造成的封接不穩。方法：以成骨細胞為研究對象，採用β－七葉素穿孔全細胞膜片鉗技術，記錄骨細胞L型鈣通道電流。結果：採用這種穿孔全細胞膜片鉗技術，能有效記錄到成骨細胞上L型鈣通道電流。結論：穿孔膜片鉗技術是一種簡便而有效的記錄全細胞電流的實驗方法，該方法的建立為今後更深入的研究疾病中成骨細胞的病理生理機製提供實驗基礎。
목적：탐토일충유효기록성골세포L형개통도전류적천공전세포막편겸방법。차방법사파리전겁여세포내액보지전화학련속성，사세포내배경보지은정，개선상규전세포막편겸파막조성적파막난화봉접불은，이급상규전세포막편겸파막후조성적봉접불은。방법：이성골세포위연구대상，채용β－칠협소천공전세포막편겸기술，기록골세포L형개통도전류。결과：채용저충천공전세포막편겸기술，능유효기록도성골세포상L형개통도전류。결론：천공막편겸기술시일충간편이유효적기록전세포전류적실험방법，해방법적건립위금후경심입적연구질병중성골세포적병리생리궤제제공실험기출。
[ ABSTRACT] AIM:To establish a perforated whole-cell patch-clamp technique withβ-escin to record L-type cal-cium current (ICa,L) in osteoblasts.METHODS:ROS 17/2.8 is a rat osteoblast-like osteosarcoma cell line.β-escin was applied to the pipette solution to permeabilize the cell membrane and the perforated patch recording mode was obtained. RESULTS:β-escin at concentration of 50μmol/L easily permeabilized the cell membrane and obtained a perforated patch recording mode in 2~7 min.This technique prevented ICa,L rundown and preserved cytoplasmic signaling pathways.CON-CLUSION:β-escin may be used as an alternative ionophore for perforated patch-clamp studies in osteoblasts and results in minimal rundown that could facilitate recordings of ICa,L in osteoblasts.
