广东医学
廣東醫學
엄동의학
GUNAGDONG MEDICAL JOURNAL
2015年
9期
1343-1345,1346
,共4页
吴依芬%李荣%贾筠%罗荣城
吳依芬%李榮%賈筠%囉榮城
오의분%리영%가균%라영성
SHP-1基因%酪氨酸磷酸酶%曲妥珠单抗%H9C2细胞
SHP-1基因%酪氨痠燐痠酶%麯妥珠單抗%H9C2細胞
SHP-1기인%락안산린산매%곡타주단항%H9C2세포
目的:初步观察转染 SHP -1基因前后大鼠心肌 H9C2细胞对抗曲妥珠单抗的能力,SHP -1蛋白表达情况及转染 SHP -1基因对 H9C2细胞增殖能力的影响。方法构建真核表达载体 pcDNA3.1(﹢)- SHP -1和 pcDNA3.1(﹢)- SHP -1C/ S,利用脂质体转染法转染大鼠心肌 H9C2细胞,经 G418筛选阳性克隆,阳性克隆细胞在曲妥株单抗中维持生长。用 Western blot 检测 SHP -1基因在大鼠心肌 H9C2细胞中的稳定表达情况,并通过流式细胞学观察细胞凋亡曲线。结果蛋白水平证实,转染细胞内有 SHP -1基因的表达,并且转染 pcDNA3.1(﹢)- SHP -1的心肌细胞 SHP -1表达明显升高,经曲妥珠单抗干预后蛋白表达量下降。转染 pcDNA3.1(﹢)-SHP -1后 H9C6细胞在曲妥珠单抗中凋亡率明显升高(P <0.05)。结论向大鼠心肌 H9C2细胞内转染 SHP -1基因并使其稳定表达,可以促进大鼠心肌 H9C2细胞的在曲妥珠单抗中的凋亡,为以后进一步探讨 SHP -1基因的功能打下了基础。
目的:初步觀察轉染 SHP -1基因前後大鼠心肌 H9C2細胞對抗麯妥珠單抗的能力,SHP -1蛋白錶達情況及轉染 SHP -1基因對 H9C2細胞增殖能力的影響。方法構建真覈錶達載體 pcDNA3.1(﹢)- SHP -1和 pcDNA3.1(﹢)- SHP -1C/ S,利用脂質體轉染法轉染大鼠心肌 H9C2細胞,經 G418篩選暘性剋隆,暘性剋隆細胞在麯妥株單抗中維持生長。用 Western blot 檢測 SHP -1基因在大鼠心肌 H9C2細胞中的穩定錶達情況,併通過流式細胞學觀察細胞凋亡麯線。結果蛋白水平證實,轉染細胞內有 SHP -1基因的錶達,併且轉染 pcDNA3.1(﹢)- SHP -1的心肌細胞 SHP -1錶達明顯升高,經麯妥珠單抗榦預後蛋白錶達量下降。轉染 pcDNA3.1(﹢)-SHP -1後 H9C6細胞在麯妥珠單抗中凋亡率明顯升高(P <0.05)。結論嚮大鼠心肌 H9C2細胞內轉染 SHP -1基因併使其穩定錶達,可以促進大鼠心肌 H9C2細胞的在麯妥珠單抗中的凋亡,為以後進一步探討 SHP -1基因的功能打下瞭基礎。
목적:초보관찰전염 SHP -1기인전후대서심기 H9C2세포대항곡타주단항적능력,SHP -1단백표체정황급전염 SHP -1기인대 H9C2세포증식능력적영향。방법구건진핵표체재체 pcDNA3.1(﹢)- SHP -1화 pcDNA3.1(﹢)- SHP -1C/ S,이용지질체전염법전염대서심기 H9C2세포,경 G418사선양성극륭,양성극륭세포재곡타주단항중유지생장。용 Western blot 검측 SHP -1기인재대서심기 H9C2세포중적은정표체정황,병통과류식세포학관찰세포조망곡선。결과단백수평증실,전염세포내유 SHP -1기인적표체,병차전염 pcDNA3.1(﹢)- SHP -1적심기세포 SHP -1표체명현승고,경곡타주단항간예후단백표체량하강。전염 pcDNA3.1(﹢)-SHP -1후 H9C6세포재곡타주단항중조망솔명현승고(P <0.05)。결론향대서심기 H9C2세포내전염 SHP -1기인병사기은정표체,가이촉진대서심기 H9C2세포적재곡타주단항중적조망,위이후진일보탐토 SHP -1기인적공능타하료기출。