生殖医学杂志
生殖醫學雜誌
생식의학잡지
JOURNAL OF REPRODUCTIVE MEDICINE
2015年
5期
402-408
,共7页
杨向祎%郭颖%曹小芳%贾艳飞%王晓尉%许剑锋%周芳%李鸿%梁小薇
楊嚮祎%郭穎%曹小芳%賈豔飛%王曉尉%許劍鋒%週芳%李鴻%樑小薇
양향의%곽영%조소방%가염비%왕효위%허검봉%주방%리홍%량소미
精液%冷冻%印记基因%亚硫酸氢盐克隆测序法%DNA甲基化
精液%冷凍%印記基因%亞硫痠氫鹽剋隆測序法%DNA甲基化
정액%냉동%인기기인%아류산경염극륭측서법%DNA갑기화
Spermatozoa%Cryopreservation%Imprinted gene%Bisulfite sequencing PCR%DNA methylation
目的 检测常规精液冷冻技术中冷冻保护剂、冷冻过程及冷冻时间长短对精子父源印记基因H19及母源印记基因MEST印记控制区域(imprinting control region,ICR)的DNA甲基化的影响程度. 方法 以10例符合精子库捐精条件的正式志愿者为研究对象,将每份精液样品平均分为4组:A组为新鲜精液,作为对照;B组加入同体积冷冻保护剂,不冷冻;C组加同体积冷冻保护剂,冷冻2d;D组加同等体积冷冻保护剂,冷冻两个月.通过亚硫酸氢盐克隆测序法分析H19及MEST ICR的DNA甲基化状态. 结果 四组(A、B、C、D组)H19基因ICR区的DNA甲基化率以克隆数计算时分别为58.70％、53.85％、49.46％和45.74％,以CpG岛数计算时分别为97.57％、97.33％、97.13％和96.56％,两者都有降低趋势,但组间差异均无统计学意义(P＞0.05);四组MEST基因ICR区甲基化率以克隆数计算时分别为41.10％、45.33％、47.30％和50.68％,以CpG岛数计算甲基化率时分别为1.77％、1.74％、2.00％和2.26％,有升高趋势,但差异亦无统计学意义(P＞0.05). 结论 常规精液冷冻复苏技术对精子父源印记基因H19及母源印记基因MEST的ICR区甲基化程度未见明显影响.
目的 檢測常規精液冷凍技術中冷凍保護劑、冷凍過程及冷凍時間長短對精子父源印記基因H19及母源印記基因MEST印記控製區域(imprinting control region,ICR)的DNA甲基化的影響程度. 方法 以10例符閤精子庫捐精條件的正式誌願者為研究對象,將每份精液樣品平均分為4組:A組為新鮮精液,作為對照;B組加入同體積冷凍保護劑,不冷凍;C組加同體積冷凍保護劑,冷凍2d;D組加同等體積冷凍保護劑,冷凍兩箇月.通過亞硫痠氫鹽剋隆測序法分析H19及MEST ICR的DNA甲基化狀態. 結果 四組(A、B、C、D組)H19基因ICR區的DNA甲基化率以剋隆數計算時分彆為58.70％、53.85％、49.46％和45.74％,以CpG島數計算時分彆為97.57％、97.33％、97.13％和96.56％,兩者都有降低趨勢,但組間差異均無統計學意義(P＞0.05);四組MEST基因ICR區甲基化率以剋隆數計算時分彆為41.10％、45.33％、47.30％和50.68％,以CpG島數計算甲基化率時分彆為1.77％、1.74％、2.00％和2.26％,有升高趨勢,但差異亦無統計學意義(P＞0.05). 結論 常規精液冷凍複囌技術對精子父源印記基因H19及母源印記基因MEST的ICR區甲基化程度未見明顯影響.
목적 검측상규정액냉동기술중냉동보호제、냉동과정급냉동시간장단대정자부원인기기인H19급모원인기기인MEST인기공제구역(imprinting control region,ICR)적DNA갑기화적영향정도. 방법 이10례부합정자고연정조건적정식지원자위연구대상,장매빈정액양품평균분위4조:A조위신선정액,작위대조;B조가입동체적냉동보호제,불냉동;C조가동체적냉동보호제,냉동2d;D조가동등체적냉동보호제,냉동량개월.통과아류산경염극륭측서법분석H19급MEST ICR적DNA갑기화상태. 결과 사조(A、B、C、D조)H19기인ICR구적DNA갑기화솔이극륭수계산시분별위58.70％、53.85％、49.46％화45.74％,이CpG도수계산시분별위97.57％、97.33％、97.13％화96.56％,량자도유강저추세,단조간차이균무통계학의의(P＞0.05);사조MEST기인ICR구갑기화솔이극륭수계산시분별위41.10％、45.33％、47.30％화50.68％,이CpG도수계산갑기화솔시분별위1.77％、1.74％、2.00％화2.26％,유승고추세,단차이역무통계학의의(P＞0.05). 결론 상규정액냉동복소기술대정자부원인기기인H19급모원인기기인MEST적ICR구갑기화정도미견명현영향.
