中国水产科学
中國水產科學
중국수산과학
Journal of Fishery Sciences of China
2015年
3期
556-562
,共7页
范玉蕾%耿毅%周燕%邓梦玲%余泽辉%汪开毓%黄小丽%陈德芳%张雨薇
範玉蕾%耿毅%週燕%鄧夢玲%餘澤輝%汪開毓%黃小麗%陳德芳%張雨薇
범옥뢰%경의%주연%산몽령%여택휘%왕개육%황소려%진덕방%장우미
虹彩病毒%蛙病毒%似鲇高原鳅%分离%鉴定%系统发育分析
虹綵病毒%蛙病毒%似鲇高原鰍%分離%鑒定%繫統髮育分析
홍채병독%와병독%사점고원추%분리%감정%계통발육분석
iridoviridae%ranavirus%Triplophysa siluroides%isolation%identification%phylogenetic analysis
从四川乐山某养殖场自然发病的似鲇高原鳅(Triplophysa siluroides)体内分离到一株病毒FYL140220.病毒感染鲤上皮瘤细胞系(epithelima popuasum cuprini,EPC)后,细胞呈现圆缩、坏死、脱落、明显空斑的病变特征.将自然发病鱼组织过滤除菌液和细胞培养病毒液分别接种健康似鲇高原鳅,试验鱼出现与自然发病鱼相同的症状,死亡率分别为30％和40％,而对照组无异常.对经FYL140220感染出现典型细胞病变(CPE)的EPC细胞制备超薄切片进行电镜观察,发现病毒呈正六边形,对称20面体,对角线直径约(103±7) nm;提取细胞培养病毒液、自然发病鱼和人工感染发病鱼的内脏器官总DNA进行蛙病毒主要衣壳蛋白(maior capsid protein,MCP)基因保守区域的PCR扩增,均能扩增出预期大小约500 bp的特异性条带.MCP基因同源性与遗传进化分析表明,分离株FYL 140220与蛙病毒属成员聚为一支,尤其与大鲵蛙病毒与沼泽绿蛙病毒同源性最高,分别达99.8％和99.6％.结合PCR检测、电镜观察和系统发育分析,确认分离病毒FYL140220为蛙病毒,这是首次报道蛙病毒可自然感染似鲇高原鳅并致死.
從四川樂山某養殖場自然髮病的似鲇高原鰍(Triplophysa siluroides)體內分離到一株病毒FYL140220.病毒感染鯉上皮瘤細胞繫(epithelima popuasum cuprini,EPC)後,細胞呈現圓縮、壞死、脫落、明顯空斑的病變特徵.將自然髮病魚組織過濾除菌液和細胞培養病毒液分彆接種健康似鲇高原鰍,試驗魚齣現與自然髮病魚相同的癥狀,死亡率分彆為30％和40％,而對照組無異常.對經FYL140220感染齣現典型細胞病變(CPE)的EPC細胞製備超薄切片進行電鏡觀察,髮現病毒呈正六邊形,對稱20麵體,對角線直徑約(103±7) nm;提取細胞培養病毒液、自然髮病魚和人工感染髮病魚的內髒器官總DNA進行蛙病毒主要衣殼蛋白(maior capsid protein,MCP)基因保守區域的PCR擴增,均能擴增齣預期大小約500 bp的特異性條帶.MCP基因同源性與遺傳進化分析錶明,分離株FYL 140220與蛙病毒屬成員聚為一支,尤其與大鯢蛙病毒與沼澤綠蛙病毒同源性最高,分彆達99.8％和99.6％.結閤PCR檢測、電鏡觀察和繫統髮育分析,確認分離病毒FYL140220為蛙病毒,這是首次報道蛙病毒可自然感染似鲇高原鰍併緻死.
종사천악산모양식장자연발병적사점고원추(Triplophysa siluroides)체내분리도일주병독FYL140220.병독감염리상피류세포계(epithelima popuasum cuprini,EPC)후,세포정현원축、배사、탈락、명현공반적병변특정.장자연발병어조직과려제균액화세포배양병독액분별접충건강사점고원추,시험어출현여자연발병어상동적증상,사망솔분별위30％화40％,이대조조무이상.대경FYL140220감염출현전형세포병변(CPE)적EPC세포제비초박절편진행전경관찰,발현병독정정륙변형,대칭20면체,대각선직경약(103±7) nm;제취세포배양병독액、자연발병어화인공감염발병어적내장기관총DNA진행와병독주요의각단백(maior capsid protein,MCP)기인보수구역적PCR확증,균능확증출예기대소약500 bp적특이성조대.MCP기인동원성여유전진화분석표명,분리주FYL 140220여와병독속성원취위일지,우기여대예와병독여소택록와병독동원성최고,분별체99.8％화99.6％.결합PCR검측、전경관찰화계통발육분석,학인분리병독FYL140220위와병독,저시수차보도와병독가자연감염사점고원추병치사.
