CAJ | 학술논문

目的：研究褪黑素膜受体（ MR）在褪黑素（ Mel）抗心肌缺血再灌注（ MI／R）损伤机制中的作用。方法雄性SD大鼠80只随机分为四组：假手术组（ Sham）、MI／R＋溶剂对照组（ MI／R＋V）、MI／R＋Mel治疗组（ MI／R＋Mel）、MI／R＋Mel＋Luz组（ MI／R＋Mel＋Luz），Luz（ Luzindole）为MR特异性阻断剂。大鼠冠状动脉左前降支结扎和松开方法建立大鼠MI／R模型，心肌缺血30 min，再灌6 h后ELISA法检测心肌组织氧化应激相关指标，TUNEL法检测心肌细胞凋亡率，Evans blue－TTC双染法测定梗死面积，Western blot法检测沉默信息转录调控因子1（ SIRT1）、乙酰化叉头转录因子1（ Ac－Foxo1）、Caspase－3及褪黑素受体（ MR）的表达水平，再灌注72 h后超声心动图法检测各组大鼠心功能。结果与缺血再灌注组相比，Mel治疗显著改善心脏左室射血分数[LVEF，（65．18±5．863）％vs （47．37±4．201）％， P＜0．01]及左室短轴缩短率[LVFS，（36．19±3．299）％vs （22．80±0．8881）％， P＜0．01]，下调心肌组织超氧化物[（2．881±0．1908）RLU／（mg·s） vs （3．955±0．3022） RLU／（mg·s）， P＜0．01]、丙二醛（MDA）生成[（269．1±11．24）pmol／mg vs （412．7±24．39）pmol／mg， P＜0．01]及gp91phox的表达[（3．404±0．2440） vs （4．388±0．1463）， P＜0．01]，上调超氧化物歧化酶（SOD）[（35．83±2．959）U／mg vs （21．11±2．004）U／mg， P＜0．01]、SIRT1[（0．8033±0．05357） vs （0．3313±0．04337）]， P＜0．01]，下调Ac－Foxo1水平[（0．2393±0．01440） vs （0．3536±0．01384）， P＜0．01]；而Luz阻断MR后逆转Mel的上述作用（均P＜0．01）。结论 Mel通过MR激活SIRT1信号通路，显著减轻大鼠MI／R氧化应激损伤，发挥抗氧化应激抗凋亡心肌保护作用。
목적：연구퇴흑소막수체（ MR）재퇴흑소（ Mel）항심기결혈재관주（ MI／R）손상궤제중적작용。방법웅성SD대서80지수궤분위사조：가수술조（ Sham）、MI／R＋용제대조조（ MI／R＋V）、MI／R＋Mel치료조（ MI／R＋Mel）、MI／R＋Mel＋Luz조（ MI／R＋Mel＋Luz），Luz（ Luzindole）위MR특이성조단제。대서관상동맥좌전강지결찰화송개방법건립대서MI／R모형，심기결혈30 min，재관6 h후ELISA법검측심기조직양화응격상관지표，TUNEL법검측심기세포조망솔，Evans blue－TTC쌍염법측정경사면적，Western blot법검측침묵신식전록조공인자1（ SIRT1）、을선화차두전록인자1（ Ac－Foxo1）、Caspase－3급퇴흑소수체（ MR）적표체수평，재관주72 h후초성심동도법검측각조대서심공능。결과여결혈재관주조상비，Mel치료현저개선심장좌실사혈분수[LVEF，（65．18±5．863）％vs （47．37±4．201）％， P＜0．01]급좌실단축축단솔[LVFS，（36．19±3．299）％vs （22．80±0．8881）％， P＜0．01]，하조심기조직초양화물[（2．881±0．1908）RLU／（mg·s） vs （3．955±0．3022） RLU／（mg·s）， P＜0．01]、병이철（MDA）생성[（269．1±11．24）pmol／mg vs （412．7±24．39）pmol／mg， P＜0．01]급gp91phox적표체[（3．404±0．2440） vs （4．388±0．1463）， P＜0．01]，상조초양화물기화매（SOD）[（35．83±2．959）U／mg vs （21．11±2．004）U／mg， P＜0．01]、SIRT1[（0．8033±0．05357） vs （0．3313±0．04337）]， P＜0．01]，하조Ac－Foxo1수평[（0．2393±0．01440） vs （0．3536±0．01384）， P＜0．01]；이Luz조단MR후역전Mel적상술작용（균P＜0．01）。결론 Mel통과MR격활SIRT1신호통로，현저감경대서MI／R양화응격손상，발휘항양화응격항조망심기보호작용。
[ Abstract]:Objective To investigate the protective effect of melatonin ( Mel) on myocardial ischemia/reperfusion ( MI/R) in?jury and the influence of melatonin membrane receptor ( MR) on MI/R injury. Methods Eighty male Sprague-Dawley rats were subjected to myocardial ischemia/reperfusion ( MI/R, I 30 min, R 6 h) operation and randomly divided into 4 groups: Sham, MI/R+V, MI/R+Mel and MI/R+Mel+Luz ( Luzindole, the specific antagonist of MR) . The cardiac function 72 h after reperfu?sion, oxidative stress damage related indicators, apoptotic index, infarct size, MR expression, SIRT1 expression, Ac-Foxo1 expres?sion were detected. Results Compared with the MI/R+V group, melatonin treatment group showed improved left ventricular ejection fraction (LVEF) (65.18±5.863) vs (47.37±4.201), ( P<0.01) and left ventricular fractional shortening (LVFS) (36.19±3.299) vs (22.80±0.8881), ( P<0.01), decreased myocardium superoxide generation (2.881±0.1908) RLU/(mg·s) vs (3.955±0.3022) RLU/(mg·s), ( P<0.01), malondialdehyde(MDA) level (269.1±11.24) pmol/mg vs (412.7±24.39) pmol/mg, ( P<0.01) and gp91phox expression (3.404±0.2440) vs (4.388±0.1463), ( P <0.01), up-regulated SIRT1 expression(0.8033±0.05357) vs(0.3313±0.04337), ( P<0.01), down-regulated Ac-Foxol expression(0.2393±0.01440) vs (0.3536±0.01384), ( P<0.01). More?over, Luz exposure significantly blocked melatonin's cardioprotective effect (all P<0.01). Conclusion The experiment showed that Mel pro?tected the heart against MI/R injury by reducing oxidative stress damage via activation of SIRT1 signaling in a MR dependent manner.