食用菌学报
食用菌學報
식용균학보
ACTA EDULIS FUNGI
2015年
1期
15-20
,共6页
申进文%粱思思%邱立友%戚元成
申進文%粱思思%邱立友%慼元成
신진문%량사사%구립우%척원성
糙皮侧耳%fst3%RACE%原核表达%半定量RT-PCR
糙皮側耳%fst3%RACE%原覈錶達%半定量RT-PCR
조피측이%fst3%RACE%원핵표체%반정량RT-PCR
Pleurotus ostreatus%fst3%RACE%prokaryotic expression%semi-quantitative RT-PCR
采用反转录PCR (reverse transcription PCR,RT-PCR)技术结合cDNA末端快速扩增(rapid amplification of cDNA ends,RACE)技术克隆出糙皮侧耳(Pleurotus ostreatus)子实体发育相关基因fst3全长,并对其进行NCBI保守域分析,用pEASY-E2原核表达系统进行原核表达,结果表明:基因全长cDNA大小为2549 bp,其中5'端非编码区62 bp,3'端非编码区99 bp,含有一个2388 bp的开放阅读框(ORF),共编码795个氨基酸;该基因属于真菌转录因子MHR超家族基因,是一类编码转录调控蛋白的基因;在原核细胞中具有表达活性,fst3基因在双核菌丝期、原基期、子实体成熟期的表达量依次增强,子实体成熟期最强.
採用反轉錄PCR (reverse transcription PCR,RT-PCR)技術結閤cDNA末耑快速擴增(rapid amplification of cDNA ends,RACE)技術剋隆齣糙皮側耳(Pleurotus ostreatus)子實體髮育相關基因fst3全長,併對其進行NCBI保守域分析,用pEASY-E2原覈錶達繫統進行原覈錶達,結果錶明:基因全長cDNA大小為2549 bp,其中5'耑非編碼區62 bp,3'耑非編碼區99 bp,含有一箇2388 bp的開放閱讀框(ORF),共編碼795箇氨基痠;該基因屬于真菌轉錄因子MHR超傢族基因,是一類編碼轉錄調控蛋白的基因;在原覈細胞中具有錶達活性,fst3基因在雙覈菌絲期、原基期、子實體成熟期的錶達量依次增彊,子實體成熟期最彊.
채용반전록PCR (reverse transcription PCR,RT-PCR)기술결합cDNA말단쾌속확증(rapid amplification of cDNA ends,RACE)기술극륭출조피측이(Pleurotus ostreatus)자실체발육상관기인fst3전장,병대기진행NCBI보수역분석,용pEASY-E2원핵표체계통진행원핵표체,결과표명:기인전장cDNA대소위2549 bp,기중5'단비편마구62 bp,3'단비편마구99 bp,함유일개2388 bp적개방열독광(ORF),공편마795개안기산;해기인속우진균전록인자MHR초가족기인,시일류편마전록조공단백적기인;재원핵세포중구유표체활성,fst3기인재쌍핵균사기、원기기、자실체성숙기적표체량의차증강,자실체성숙기최강.
